詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:PAK抑制劑(KPT-9274)
英文名稱:KPT-9274
產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
KPT-9274是PAK的抑制劑,在MTT試驗中測定的IC50值小于100nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1643913-93-2 純度:99.28% 分子量:610.63 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
短波單胞菌屬粘合抗體(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)抗體Anti-IL27B(EBI3) Antibody胎盤特異性蛋白9(PLAC9)
無花果曲霉糖皮質激誘導腫瘤壞死因子受體抗體Anti-IL27 Antibody胎盤膠原凝集1(CLP1)
硫磺菌(硫色多孔菌)TANK抗體Anti-IL2RA Antibody胎盤堿性磷(ALPP)
大腸埃希氏菌脂多糖相關反應蛋白5/γ-taxilin抗體Anti-IL2RB Antibody胎盤鈣黏蛋白(CDHP)
黑木耳胸苷合成抗體Anti-IL2RG Antibody胎兒腎鈣黏蛋白(KCAD)
白僵菌硫氧還蛋白抗體Anti-IL2RB Antibody羧肽Z(CPZ)
產黃青霉腫瘤易感基因101蛋白抗體Anti-IL3 Antibody羧肽X2(CPX2)
尖孢鐮刀菌西瓜專化型四分子交聯(lián)體1抗體(四旋蛋白)Anti-IL3 Antibody羧肽X1(CPX1)
簡青霉四分子交聯(lián)體2抗體(四旋蛋白)Anti-IL3 Antibody羧肽O(CPO)
大腸埃希菌TTC33蛋白抗體Anti-IL3 Antibody羧肽N2(CPN2)
阿維菌鏈霉菌四分子交聯(lián)體3抗體(四旋蛋白)Anti-IL3 Antibody羧肽N1(CPN1)
大腸埃希氏桿菌T淋巴白血病同源蛋白2抗體Anti-IL3 Antibody羧肽M(CPM)
蚜蟲莫氏黑粉菌跨膜蛋白132A抗體Anti-IL3 Antibody羧肽E(CPE)
樟疫霉四聚體多肽蛋白21B抗體Anti-IL32 Antibody羧肽D(CPD)
楊生盾殼霉原肌球蛋白1抗體Anti-IL31 Antibody羧肽A6(CPA6)
Lysinibacillus xylanilyticus轉錄增強因子TEF3抗體Anti-IL33 Antibody羧肽A5(CPA5)
染色體特異性轉錄延伸因子抗體博拉迪酵母小鼠子宮平滑肌細胞
信號誘導增殖相關蛋白1樣蛋白2抗體融合魏斯氏菌小鼠卵巢上皮細胞
DNA聚合δ相互作用蛋白3抗體燦爛類芽胞桿菌小鼠子宮成纖維細胞
絲/蘇蛋白激SRPK2抗體茯苓(斜面)小鼠卵巢顆粒細胞
PAK抑制劑(KPT-9274)甲型副傷寒沙門氏 鎂、錳、鉬、鍶、、釩、鋅/Mg, Mn, Mo, Sr, Tl, V, Zn甲狀腺Elisa
西藏木霉 氟、、溴、硫酸根、亞硝酸根、 硝酸根、磷酸根/F, Cl, Br, SO4, NO2, NO3,胃饑餓Elisa
產氣莢膜梭 B型 氟、、溴、硫酸根、亞硝酸根、硝酸根、磷酸根/F, Cl, Br, SO4, NO2, NO3, P胃泌Elisa
釀酒酵母 氟、、溴、硫酸根、亞硝酸根、硝酸根、磷酸根/F, Cl, Br, SO4, NO2, NO3, P胰島Elisa
叢毛單胞 鈷、鉻、鐵、錳、鎳、鈦、釩/Co, Cr, Fe, Mn, Ni, Ti, V卵黃蛋白原Elisa
傳染性支氣管炎病 鎘、鉻、銅、鐵、鎳、鉛、鋅/Cd, Cr, Cu, Fe, Ni, Pb, Zn黃體生成Elisa
銅綠假單胞/綠膿桿 鎘、鈷、鉻、銅、鐵、、鋰/Cd, Co, Cr, Cu, Fe, K, Li促卵泡Elisa
巨大芽孢桿 鉍、鍺、銦、鋰、鈧、鋱、釔 /Bi, Ge, In, Li, Sc, Tb, Y成熟促進因子Elisa
空泡單胞 、鈣、鐵、、鋰、鎂、鈉/B, Ca, Fe, K, Li, Mg, Na肌球蛋白Elisa
草酸青霉 金、鈹、鎵、鍺、鉬、鈦、鋯/Au, Be, Ga, Ge, Mo, Ti, Zr組氨酰tRNA合成Elisa
葡萄座腔 鋁、、銅、鐵、鈦、釩、鋯/Al, B, Cu, Fe, Ti, V, Zr脫3bElisa
腸膜明串珠 鋁、、鋇、鈹、鈷、鉬、鈦/Al, B, Ba, Be, Co, Mo, Ti狀腺原氨酸Elisa
變紅青霉 鋁、砷、鈷、銅、鐵、鎳、鉛/Al, As, Co, Cu, Fe, Ni, Pb甲狀腺Elisa
多形擬桿 銦、鉍、銅、鐵、鉛、鈀、銻/Ag, Bi, Cu, Fe, Pb, Pd, Sb脫3bElisa
土地桿 銀、鉍、銅、鐵、鉛、鈀、銻/Ag, Bi, Cu, Fe, Pb, Pd, Sb白介10Elisa