商品介紹:
RN486是高活性Btk抑制劑,IC50為4.0nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1242156-23-5 純度:99.38% 分子量:606.69 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Btk抑制劑(RN486)
英文名稱:RN486
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
扎魯司特英文名稱: Zearalenone from Giberella zeae磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體包裝5g
扎托布洛芬英文名稱: Zinc carbonate basic蛋白酪磷1C抗體包裝25g
周效磺(磺多辛)英文名稱: Zinc distearate磷化蛋白酪磷1C抗體包裝5g
左羥英文名稱: Zinc hydroxide磷化蛋白酪磷1C抗體包裝1g
左旋英文名稱: Zinc iodide磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝25g
佐米曲普坦英文名稱: Zinc phosphate tetrahydrate磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝5g
佐匹克英文名稱: Zinc sulfide磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝1g
(R)-9-[2-(二乙基磷酰氧基)基]腺嘌呤英文名稱: Zirconium (IV) oxide磷化蛋白激C theta抗體包裝5g
5'-O-(4,4'-二氧基三基)-N6-酰...英文名稱: Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate磷脂酰肌激p85β抗體包裝1g
紅霉B英文名稱: Zirconium hydroxide hydrate磷化磷脂酰肌激p85β抗體包裝100g
(+)-5-反式前列英文名稱: α-(Trichloromethyl)benzyl acetate磷化蛋白磷2C亞型α抗體包裝25g
(+)-α-酚醋鹽英文名稱: Trimethylacetic acid三磷腺苷受體受體P2X2抗體包裝5g
(+)-前列英文名稱: Transfection Reagents-Biofection磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝1g
(+/-)-4'-羥基硫心得安英文名稱: trans-Cinnamaldehyde多型性腺瘤基因1蛋白抗體包裝5g
(+/-)-4-羥基鹽心得安英文名稱: Fullerene C60 (pure)撲克蒙蛋白抗體包裝100g
生鏈霉菌Streptomyces│chlorobiens 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品胱天蛋白1試劑盒冬凌草-對照品;有報告
托姆青霉Penicillium│thomii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品胱硫β-合試劑盒D-果糖;標準品
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品胍基丁脲解/凝集試劑盒三聚;純品型;標準品;有證書
Btk抑制劑(RN486)狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原4'-去氧表鬼臼(標準品)Human, Mouse, Rat
微管蛋白-γ抗原4-β-D-葡萄糖-1,3,7-三羥呫噸Human, Mouse
TWIST蛋白抗原4-傘形-β-D-木糖苷Human
胸腺β10抗原4-羥喹唑啉Human
新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)4-硝兒茶酚(標準品)Human, Mouse, Rat
上游激因子1抗原4’-O-補骨脂查爾BHuman, Mouse
泛蛋白4β-羥黃芪紫檀烷苷(標準品)Human
兔抗血管抑制蛋白1抗原5,7,4'-三羥-8-二氫黃(標準品)Human, Mouse, Rat
血管內(nèi)皮粘附分子抗原5,7-二羥色原Human, Mouse, Rat