商品介紹:
AS1842856是有效地,可滲透細(xì)胞的Foxo1抑制劑,IC50值為30nM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):836620-48-5 純度:98.09% 分子式:C??H??FN?O? 分子量:347.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Foxo1抑制劑(AS1842856) | AS1842856 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
球孢白僵菌硫乙酰肝蛋白多糖2Human SRX1(Sulfiredoxin-1) ELISA Kit大鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒
金9401(金針菇)肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25aHuman SS18L2 ELISA Kit大鼠二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)免疫試劑盒
名稱己糖激3抗體Human FZD1(Frizzled-1) ELISA Kit大鼠二氧化(DAO)免疫試劑盒
黃柄曲霉人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體Human SSH3 ELISA Kit大鼠兒茶酚抑免疫試劑盒
黑曲霉人乙肝病pre S1蛋白抗體Human SRFBP1 ELISA Kit大鼠兒茶酚(CA)免疫試劑盒
盾殼霉己糖激1抗體Human SSR4 ELISA Kit大鼠多藥耐藥蛋白1(ABCB1)免疫試劑盒
釀酒酵母己糖激2抗體Human SRGAP2 ELISA Kit大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)免疫試劑盒
斜臥青霉熱休克蛋白90α抗體Human SRGAP1 ELISA Kit大鼠多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)免疫試劑盒
大腸埃希菌肝源性纖維蛋白原相關(guān)蛋白1抗體Human SSRP1 ELISA Kit大鼠多巴D2受體配體(D2RL)免疫試劑盒
果蔬汁 三唑磷、、磷、 乙酰磷紅分化相關(guān)基因蛋白抗體Human SSSCA1 ELISA Kit大鼠多巴D2受體(D2R)免疫試劑盒
細(xì)致交鏈孢同源異型盒基因HOXA13抗體Human SRGAP3 ELISA Kit大鼠多巴D1受體(D1R)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母磷化組蛋白去乙?;?/span>4(Ser246)抗體Human SSTR3 ELISA Kit大鼠多巴(DA)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化組蛋白去乙?;?/span>7抗體Human SRI ELISA Kit大鼠對(duì)氧磷1(PON1)免疫試劑盒
木葡萄球菌磷化組蛋白去乙?;?/span>4抗體Human FZD3(Frizzled-3) ELISA Kit大鼠端粒(TE)免疫試劑盒
滑菇磷化組蛋白去乙?;?/span>7抗體Human SSTR5 ELISA Kit大鼠蕈堿型乙酰受體(M-AChR)免疫試劑盒
淺綠黃假單胞菌HIRA相互作用蛋白3抗體Human ST6GALNAC5 ELISA Kit大鼠頂體蛋白(ACR)免疫試劑盒
天山中慢生根瘤菌Mesorhizobium│tianshanense 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品松蘿
發(fā)酵假絲酵母Candida│fermentati 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品漢黃芩
DSM 22959Akkermansia muciniphila 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品葫蘆B
Foxo1抑制劑(AS1842856)phospho-Afadin(Ser1718) 化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體(+)-兒茶 98%
alpha-L-arabinofuranosidase 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷抗體咖啡 分析標(biāo)準(zhǔn)品
AFP 胎蛋白抗體腦脂 98%,氬氣封裝
AFP 胎蛋白單克隆抗體(包被)桂皮 99%
Hepatocyte 人肝單克隆抗體桂皮 98%
AFP 胎蛋白單克隆抗體(檢測(cè))結(jié)晶紫 分析標(biāo)準(zhǔn)品
AGER 晚期糖化終末產(chǎn)物特異性受體抗體環(huán)庚烷 97%
AGEs 晚期糖化終末產(chǎn)物抗體(S)-(-)-β-香茅 99%