以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
AR231453是GPR119激動(dòng)劑,能增強(qiáng)葡萄糖依賴的胰島素分泌和GLP-1釋放。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):733750-99-7 純度:99.49% 分子式:C??H??FN?O?S 分子量:505.52 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
土地叢毛單胞菌G蛋白偶合受體激1抗體Human TBCB ELISA Kit大鼠角化生長因子(KGF)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母促胃泌釋放肽抗體Human TBX21/T-bet ELISA Kit大鼠角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢磷化G蛋白通路抑制蛋白1抗體Human TDGF1(TeRatocarcinoma-derived growth factor 1) ELISA Kit大鼠膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒
解烴棒桿菌腦糖原磷化抗體Human NPR2(Atrial natriuretic peptide receptor 2) ELISA Kit大鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒
Fusarium venenatum NirenbergG基丁受體3抗體Human TAP1 ELISA Kit大鼠膠原C末端肽(CTX)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌G基丁受體α3抗體Human TBCC ELISA Kit大鼠降鈣原(PCT)免疫試劑盒
草木樨中華根瘤菌GEN1蛋白抗體Human MTTP(Microsomal triglyceride transfer protein large subunit) ELISA Kit大鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
光滑青霉谷酰磷核糖基焦磷酰基轉(zhuǎn)移Human TBCD ELISA Kit大鼠降鈣(CT)免疫試劑盒
蜂房哈夫尼菌α-半乳糖苷抗體Human TBCA ELISA Kit大鼠堿性磷(ALP)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌蛋白偶聯(lián)受體55抗體Human TARS2 ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長因子6(bFGF-6)免疫試劑盒
香菇生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γHuman TARSL2 ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長因子4(bFGF-4)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌生長停滯特異性蛋白2家族3抗體Human TAF1L ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢顆粒K抗體Human TAF1 ELISA Kit大鼠甲狀腺抗體(TAb)免疫試劑盒
灰葡萄孢菌*甘油磷二酯磷結(jié)構(gòu)域5抗體Human TAF3 ELISA Kit大鼠甲狀腺(T4)免疫試劑盒
球孢白僵菌γ谷酰轉(zhuǎn)移抗體Human TAF6L ELISA Kit大鼠甲狀腺球蛋白IgG抗體免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母G1基丁A型受體α1抗體Human TAF5L ELISA Kit大鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒
構(gòu)巢裸孢殼Emericella│nidulans 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)鹽益母草堿
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)去異波爾定
被孢霉屬Mortierella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品土荊皮乙
GPR119激動(dòng)劑(AR 231453)4EBP1 eIF4E結(jié)合蛋白抗體抗壞血 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-4EBP1(Ser64) 化4E結(jié)合蛋白1抗體抗壞血 ≥99.9998% (metals basis)
phospho-4EBP1(Thr37/46) 化4E結(jié)合蛋白1抗體苯 99.7%,無水級(jí)
phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70) 化eIF4E結(jié)合蛋白抗體檸檬鉍銨 99%
5-HT 5-羥色抗體酰苯 99.95%,升華純化
5-HTR1A 5-羥色受體1A抗體對(duì)氨偶氮苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
5-HTR1B 5-羥色受體1B抗體偶氮熒光桃紅 Dye content 90 %
5-HTR2B 5-羥色受體2B抗體全反式-β-阿林胡蘿卜 96%