p38抑制劑(SCIO-469)公司*的產(chǎn)品：TNF- Alpha(Mouse Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子α三 Standard for GC
TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子β化亞銅 AR，97%
Col IV (Mouse C

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：p38抑制劑(SCIO-469)

英文名稱：SCIO-469

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

無Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A2 Antibody含亮豐富重復(fù)蛋白3C(LRRC3C)

宇佐美曲霉PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A3 Antibody含卷曲螺旋域蛋白80(CCDC80)

圣格奧爾根菌Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A5 Antibody含卷曲螺旋域蛋白3(CCDC3)

多主葡萄殼菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A6 Antibody含卷曲螺旋C2域蛋白1A(CC2D1A)

莖瘤固氮根瘤菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A6 Antibody含膠原三螺旋重復(fù)蛋白1(CTHRC1)

樹舌Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-SLC22A7 Antibody含堿性螺旋環(huán)螺旋域蛋白B8(BHLHB8)

冷彎曲菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-Slc25a1 Antibody含桿狀病IAP重復(fù)蛋白6(BIRC6)

釀酒酵母Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-SLC25A1 Antibody含鈣通道Flower域蛋白(CACFD1)

擲孢酵母Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgGAnti-SLC25A16 Antibody含動(dòng)力蛋白重鏈域蛋白1(DNHD1)

玫煙色擬青霉（10個(gè)工作日）PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-SLC25A19 Antibody含V-Set域T激活抑制因子1(VTCN1)

黃曲霉PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-SLC2A1 Antibody含V-Set免疫球蛋白域蛋白2(VSIG2)

赤霉菌屬Cy5標(biāo)記的兔抗大鼠IgGAnti-SLC26A4 Antibody含Toll白介1受體域銜接蛋白(TIRAP)

葫蘆小叢殼Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgGAnti-SLC2A1 Antibody(PB0439)含TCP1伴侶蛋白亞基2(CCT2)

釀酒酵母PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgGAnti-SLC2A12 Antibody含SET域蛋白7(SETD7)

枯草芽孢桿菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgGAnti-SLC2A10 Antibody含RUN域半胱豐富域芐1相互作用蛋白(Rubicon)

長(zhǎng)白山傘枝霉FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgGAnti-SLC2A2 Antibody(PB0440)含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)

神經(jīng)束蛋白抗體色褐鏈霉菌大鼠腸巨噬細(xì)胞提取物

核分布基因E同源蛋白1抗體宋氏志賀氏菌（暫無）大鼠胰島細(xì)胞提取物

絲/蘇蛋白激NEK9抗體季也蒙畢赤酵母大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞提取物

多胺調(diào)控因子1抗體偶發(fā)分枝桿菌偶發(fā)亞種大鼠胰腺上皮細(xì)胞提取物
p38抑制劑(SCIO-469)假單孢 甲磺酸達(dá)氟沙星

赭鮭色青霉 鹽酸沙拉沙星

黃色考克氏 化錳

畫眉草黑粉 花生分離蛋白

假單胞屬 氟甲喹

里氏木霉 五加皂苷E

枯草芽孢桿 尿黑酸

新型隱球酵母 二氫木蝴蝶A

短小芽孢桿 鹽酸異腎上腺

馬鏈球馬亞種 6-甲基-5,6-二氫-2H-吡喃-2-酮

假單胞 氨基胍鹽酸鹽

膠韌革(榆耳，榆蘑) 3,5-二甲氧基二苯乙烯

土地桿屬 D-別蘇氨酸

塔賓曲霉 特美汀

釀酒酵母 阿嗎定