NF-κB抑制劑(BAY 11-7082)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC 熒光素標記磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-FAS(Apo-a1/CD95)/Biotin 標記兔抗人、大鼠、小鼠載脂蛋白A1抗體IgGMulti-class antibodi

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
新穿心蓮內(nèi)酯（標準品）英文名稱： Tenacissoside H粘附分子3抗體（脊髓灰質(zhì)炎病受體相關蛋白3）包裝5g

新地奧斯明英文名稱： Cucurbitacin E螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體包裝1g

新綠原(標準品)英文名稱： Koumine胚胎發(fā)育相關蛋白Nodal抗體包裝5g

新芒果苷(標準品)英文名稱： Gelsemine增殖相關蛋白NANOS1抗體包裝1g

新藤黃(標準品)英文名稱： Procyanidin B1同源盒蛋白NOBOX抗體包裝5g

新烏頭原堿（標準品）英文名稱： Cyasterone轉錄因子NAC1抗體包裝100g

杏葉防風（標準品）英文名稱： Tetrahydroberberine,THB神經(jīng)生長因子受體抗體包裝25g

雄蠶蛾（家蠶）（標準品）英文名稱： Tenacissoside I磷化KB抑制蛋白激ε包裝500g

熊膽粉（標準品）英文名稱： Tenacissoside G磷化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體包裝1g

熊果苷（標準品）英文名稱： Praeruptorin C1型神經(jīng)纖維瘤抗體包裝250mg

熊果；烏蘇(標準品)英文名稱： Pterostilbene磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體包裝5g

繡線菊（標準品）英文名稱： Pterostilbene中心粒蛋白Nudel抗體包裝100g

溴東莨菪堿（標準品）英文名稱： Rotenone磷化中心粒蛋白Nudel抗體包裝25g

徐長卿（標準品）英文名稱： 7-Epitaxol類固脫氫樣蛋白NSDHL抗體包裝25g

續(xù)斷（川續(xù)斷）（標準品）英文名稱： Solasodine磷化核因子p50/k基因結合核因子抗體包裝5g

熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR解整合樣金屬蛋白33試劑盒川芎;Tetramethylpyraz

裂孔平伏菌Poria│versipora (Pers.) Romell 質(zhì)量規(guī)格：>99%解整合樣金屬蛋白19試劑盒茶多酚;Tea polyphenol

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品解整合樣金屬蛋白15試劑盒茶;L-Theanine
NF-κB抑制劑(BAY 11-7082)腫瘤/抗原家族4亞型7抗體蓮子心（標準品） 1-Hexanol

GDNF家族受體α3抗體 GFR α3兩面針（標準品） 1-Hexadecanol

甘受體β/GlyR β抗體亮菌(標準品) 1,6-Hexanediol

神經(jīng)甘肽樣肽GALP抗體遼東楤木皂苷X(標準品) Heptadecane

甘肽受體2抗體了哥王（標準品） Heiacontane

甘肽受體3抗體烈香杜鵑（標準品） Hexacosane

腦腸肽受體抗體烈香杜鵑油（標準品） 2,5-Hexanedione

GRC5蛋白抗體林生續(xù)斷苷I 2,5-Hexanedione

腸和大腦特定同源蛋白1抗體林澤蘭內(nèi)酯B（標準品） 3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester