mTOR抑制劑(Temsirolimus)公司*的產(chǎn)品：Human Urotensin II 人尾加壓IIN-(叔丁氧羰)-D-賴氨 98%
TSLP(human) 人胸腺質(zhì)淋巴生成硅 AR,K2CIO3 47-51%
PLGH 人胎盤生長(zhǎng)2--4-咪唑 96%
FN 人纖維連結(jié)蛋白2--4-咪唑 99%
YKL-40/CGP-39 human 軟骨糖蛋白39(人)咪唑 99%

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：mTOR抑制劑(Temsirolimus)

英文名稱：Temsirolimus

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

芽孢桿菌屬免疫球蛋白超家族成員10抗體Human RIMKLB ELISA KitBeta Agonists(β-)免疫試劑盒

芽胞桿菌大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體Human LRP11(Low-density lipoprotein receptor-related protein 11) ELISA Kit19-Nortestosterone(19-去甲睪)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌鲇澤亞種干擾α受體抗體Human RIMS4 ELISA Kit左右不對(duì)稱發(fā)育因子2(LEFTY2)

焦曲霉磷化干擾α受體抗體Human RIN3 ELISA Kit組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)

玫瑰皮黃鏈霉菌磷化胰島受體β抗體Human RINT1 ELISA Kit組織因子途徑抑制物(TFPI)

樟疫霉核因子κB抑制蛋白E抗體Human RING1 ELISA Kit組織因子(TF)

貝萊斯芽胞桿菌磷化整合β4抗體Human ribosomal protein L4 ELISA Kit組織型纖溶原激活劑(t-PA)

大腸埃希氏菌磷化整合β4抗體Human RIC8A ELISA Kit組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)

嗜腳動(dòng)物咸海鮮球菌IQCD蛋白抗體Human DDT(D-Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit組織相容性2-K1-K區(qū)(H2-K1)

硝鹽還原嗜鹽堿桿菌IQCC蛋白抗體Human RGS5 ELISA Kit組織多肽特異性抗原(TPS)

棲土曲霉IQCA1蛋白抗體Human RGS7(Regulator of G-protein signaling 7) ELISA Kit組織多肽抗原(TPA)

矩圓黑盤孢集成復(fù)雜蛋白亞單位3抗體Human RGS9 ELISA Kit組織蛋白去乙?；?HD)

孤島海桿狀菌干擾alpha 14蛋白抗體Human RGSL1 ELISA Kit組織蛋白抗體(Cath Ab)

嗜松籃狀菌白介6抗體Human RHBDD1 ELISA Kit組織蛋白S(CTSS)

環(huán)狀芽胞桿菌白介-10抗體Human RHBDL2 ELISA Kit組織蛋白L1(CTSL1/CTSL)

植物乳桿菌植物亞種白介6抗體Human RHCG ELISA Kit組織蛋白K(cath-K)

AS2.590資源名稱: 平滑假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)蘆薈苷

赭鮭色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)苦玄參苷IB

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)苦玄參苷IA
mTOR抑制劑(Temsirolimus)短小芽胞桿 4-二甲基氨基熱休克蛋白27Elisa

Lonsdalea quercina subsp. quercina N-乙酰-3，5-二-L-酪氨酸熱休克蛋白-70Elisa

地衣芽孢桿 3,5-二甲氧基苯熱休克蛋白90Elisa

條紋炭角 磺吡乳清蛋白Elisa

枯草芽孢桿 2,5-二甲氧基苯乳酸Elisa

發(fā)酵乳桿 異脲酸三烯酯乳酸脫氫Elisa

圓芝6號(hào) 2-甲基氨-5-二苯甲酮乳鐵蛋白Elisa

施氏假單胞 碳酸二苯酯狀腺原氨酸Elisa

香氣紅冬孢鎖擲孢酵母 二芐酮生長(zhǎng)Elisa

大腸埃希氏 乙酯視黃結(jié)合蛋白Elisa

馬腺疫鏈球獸疫亞種 烯硫視黃結(jié)合蛋白4Elisa

杉葉散斑殼 甲基烯酸環(huán)己酯瘦Elisa

弓形蟲(chóng)(GJS-2株) 苯基化鎂酸性磷酸Elisa

根瘤 環(huán)己羧甲基賴氨酸Elisa

三葉草根瘤 馬來(lái)酸二烯酯鎖鏈Elisa