異染顆粒染色液(改良Albert法)公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-Met (Tyr1003) /FITC 熒光標(biāo)記化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因)抗體IgG十二烷化銨 99%，離子對(duì)色譜級(jí)
Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC 熒光標(biāo)記化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因)抗體IgG十二烷溴化銨 99%
Phospho-Met (Tyr1349) /FITC 熒光標(biāo)記化肝生長(zhǎng)

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
山扁豆生棒孢α2C-AR腎上腺能受體抗體Human CAMK2B(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type II subunit beta) ELISA Kit豬D二聚體(D2D)免疫試劑盒

瑞氏青霉中心體蛋白AZI1抗體Human CDCA8(Cell division cycle-associated protein 8) ELISA Kit豬C肽(C-Peptide)免疫試劑盒

大麗花輪枝孢α蛋白激3抗體（心?。〩uman MAP4K4 ELISA Kit豬C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒

葡枝根霉表皮型脂氧合3抗體（魚(yú)鱗病相關(guān)蛋白）Human MAP4K5 ELISA Kit豬c-fos 免疫試劑盒

研究團(tuán)隊(duì)節(jié)桿菌錨蛋白重復(fù)域28抗體Human Matrilin 2 ELISA Kit豬B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒

芽孢八疊球菌屬淋巴相關(guān)AF4樣蛋白抗體Human MAPK11(Mitogen-activated protein kinase 11) ELISA Kit豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒

乳酒假絲酵母錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體Human MAP7 ELISA Kit豬Apelin(APLN)免疫試劑盒

玫煙色棒束孢錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體Human MAP7 ELISA Kit豬5羥色(5-HT)免疫試劑盒

秀珍菇錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Human MAPK12 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)免疫試劑盒

冷溫木拉克酵母錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體Human MAPK4 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

樹(shù)脂殼菌脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體Human MAPK13 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒

金黃紅色球菌載脂蛋白L3抗體Human MAPK7 ELISA Kit豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒

釀酒酵母腫瘤/抗原81抗體Human MAPK6 ELISA Kit豬25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒

芽胞桿菌共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣2抗體Human MAPKBP1 ELISA Kit豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒

釀酒酵母鹽耐藥蛋白ARS2抗體Human Marcks ELISA Kit豬17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒

約氏乳桿菌芳香基硫酯1抗體Human MAPRE2 ELISA Kit豬1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR二試劑盒異橙黃

巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)試劑盒月桂氮卓

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR別孕烯/3α,5α-四氫孕試劑盒油
異染顆粒染色液(改良Albert法)黑腐皮殼 8-甲氧基-2-甲基喹啉屋塵螨變應(yīng)原Derp1 IgG抗體Elisa

衛(wèi)矛擬盤(pán)多毛孢 2-氨基-5-溴-4-甲基噻唑C-C趨化因子6Elisa

細(xì)鏈格孢 4-乙炔基甲酯肌漿;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATPElisa

蘋(píng)果鏈格孢 2-溴-3-(2-乙基己基)噻吩腦啡肽Elisa

小青霉 1,4-二氧六環(huán)-2-酮凝集Elisa

雙孢蘑菇 3-氟-4-溴-苯乙酮酪蛋白激2Elisa

大腸埃希 4-乙炔基苯RGD三肽Elisa

青色鏈霉 1-嘧啶2--4-羧酸癌標(biāo)志物-CA153Elisa

褐疣柄牛肝 2,4-二-5-氟苯屋塵螨變應(yīng)原Derp1 IgE抗體Elisa

枯草芽孢桿 3-甲氧基烯酸甲酯泛樣修飾因子激活1Elisa

新城疫病 3'-苯酮胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5Elisa

黑曲霉 3-氨基-3-(3,4-二甲氧基苯基)酸IV型前膠原Elisa

裂褶 3-溴-4-甲氧基苯甲20S蛋白體Elisa

木拉克酵母屬 (S)-1-氨基-3--2-鹽酸鹽CD200分子Elisa

雞痘病 叔丁基磺酰過(guò)氧化4Elisa