產(chǎn)品屬性:
中文名稱:人I型PRMTs抑制劑(MS023)
英文名稱:MS023
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
MS023是一種有效的,有細(xì)胞活性的,選擇性人I型PRMTs抑制劑,IC50為4-119nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1831110-54-3 純度:99.84% 分子量:287.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
土壤玫瑰單胞菌環(huán)指蛋白215抗體Anti-DRD2 Antibody原鈣黏β10(PCDHβ10)
玉米大斑凸臍蠕孢菌環(huán)指蛋白187抗體Anti-DRD5 Antibody原鈣黏β1(PCDHβ1)
圍小叢殼菌磷化指狀蛋白RET抗體Anti-DRD4 Antibody原鈣黏α9(PCDHα9)
枯草芽孢桿菌骨保護(hù)蛋白配體抗體(破骨分化因子)Anti-DRP1/DNM1L Antibody原鈣黏α8(PCDHα8)
紅擬迷孔菌磷化成視網(wǎng)膜瘤抑癌蛋白抗體Anti-DROSHA Antibody原鈣黏α7(PCDHα7)
枯草芽孢桿菌G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體Anti-DSG2 Antibody原鈣黏α6(PCDHα6)
奧氏蜜環(huán)菌核受體RXRα抗體Anti-DSG1 Antibody原鈣黏α5(PCDHα5)
香菇Rho相關(guān)蛋白激1抗體Anti-DSG2 Antibody原鈣黏α4(PCDHα4)
球毛殼環(huán)指蛋白156抗體Anti-DSG3 Antibody原鈣黏α3(PCDHα3)
不吸水鏈霉菌RRAD抗體Anti-DUT Antibody原鈣黏α2(PCDHα2)
鴨疫里氏桿菌Runx3抗體Anti-DSP Antibody原鈣黏α13(PCDHα13)
釀酒酵母Rad51抗體Anti-DUSP3 Antibody原鈣黏α12(PCDHα12)
納西桿菌屬維甲受體RAR α/RAR α抗體Anti-DUSP3 Antibody原鈣黏α11(PCDHα11)
平菇—新平1012維甲受體β抗體Anti-DVL1 Antibody原鈣黏α10(PCDHα10)
長枝木霉Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體Anti-DVL2 Antibody原鈣黏α1(PCDHα1)
香菇抵抗抗體Anti-DYNLT1 Antibody原鈣黏9(PCDH9)
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
毛木耳Auricularia│polytricha 質(zhì)量規(guī)格:純度大于98%,BR,一物
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國進(jìn)口
人I型PRMTs抑制劑(MS023)馬勃狀硬皮馬勃 木糖-明膠培養(yǎng)基小反芻獸疫抗體Elisa
擬隱孢殼屬 動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基胸膜肺炎放線ApxⅣ抗體Elisa
炭疽芽胞桿 酚紅葡萄糖肉湯偽狂犬病病GB抗體Elisa
雜17 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂繁殖與呼吸綜合征病X3抗體Elisa
類諾卡氏屬 布氏瓊脂CD40配體抗體Elisa
深褐芽孢桿 馬尿酸鈉培養(yǎng)基肺疫抗體Elisa
華農(nóng)產(chǎn)黃細(xì) 波爾頓選擇性增肉湯丹抗體Elisa
豬肺炎支原體(可訂購) CCDA基礎(chǔ)α半乳糖苷Elisa
土生叢毛單胞 4,4'-(1-苯乙基)雙酚補(bǔ)體片斷3aElisa
假單胞 CCDA添加劑細(xì)小病Elisa
靈芝 3%NaCl賴氨酸脫羧β-神經(jīng)生長因子Elisa
總狀毛霉 3%NaCl鳥氨酸脫羧氧化低密度脂蛋白Elisa
假長雙歧桿假長亞種 3-氨基-4-羥基乙腦病抗體Elisa
鏈格孢 1%NaCl甘露犬尿氨酸Elisa
球黑孢 OF腎損傷分子1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)