商品介紹:
GSK682753A是EB病毒誘導(dǎo)受體2(EBI2)的反向激動(dòng)劑,IC50值為53.6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1334294-76-6 純度:98.47% 分子量:479.78 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):EBI2反向激動(dòng)劑(GSK682753A)
英文名稱(chēng):GSK682753A
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
球孢白僵菌2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體Human FGF16 ELISA Kit豚鼠白介4(IL-4)免疫試劑盒
強(qiáng)壯根瘤菌科凱恩氏綜合癥相關(guān)蛋白/早衰蛋白CSA抗體Human FGF17 ELISA Kit豚鼠白介22(IL-22)免疫試劑盒
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)磷化角蛋白8抗體Human FMN2 ELISA Kit豚鼠白介2(IL-2)免疫試劑盒
日本色鹽桿菌磷化角蛋白8抗體Human FGF18 ELISA Kit豚鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌磷化角蛋白18抗體Human FDX1 ELISA Kit豚鼠白介1β(IL1B)免疫試劑盒
腐皮鐮孢菌胞粘蛋白2抗體Human FDXACB1 ELISA Kit豚鼠白介18(IL-18)免疫試劑盒
新鞘菌色CPA6抗體Human FEM1B ELISA Kit豚鼠白介17(IL-17)免疫試劑盒
戊糖片球菌色CYP3A抗體Human FDPS ELISA Kit豚鼠白介13(IL-13)免疫試劑盒
馬鈴薯炭疽病菌色cP450 CYP20A1抗體Human FEM1C ELISA Kit豚鼠白介12(IL-12/P70)免疫試劑盒
雅致小克銀漢霉色cP4501B1抗體Human FKBP1A ELISA Kit豚鼠白介10(IL-10)免疫試劑盒
大腸埃希菌色cP450 CYP26A1抗體Human FEN1 ELISA Kit豚鼠白介1(IL-1)免疫試劑盒
短乳桿菌磷化周期E抗體Human FGFBP3 ELISA Kit豚鼠白蛋白免疫試劑盒
火木層孔菌磷化周期E2抗體Human FGFR1OP ELISA Kit豚鼠γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
小麥蒼白桿菌周期M3抗體Human FHIT ELISA Kit豚鼠α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
鹽海洋菌屬周期Y/X抗體Human FKBP1B ELISA Kit豚鼠P物質(zhì)(SP)免疫試劑盒
蘋(píng)果木層孔菌磷化周期D3抗體Human FER ELISA Kit豚鼠Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6)免疫試劑盒
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα1抗試劑盒青蒿琥酯
平菇Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRα1防御試劑盒曲克蘆丁
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRα1β糖蛋白試劑盒氫高烏
EBI2反向激動(dòng)劑(GSK682753A)端羥基右旋聚乳(重均分子量170-206萬(wàn))英文名稱(chēng): Loxapine succinate salt神經(jīng)前體表達(dá)蛋白1抗體包裝25g
端羥基右旋聚乳(重均分子量206-288萬(wàn))英文名稱(chēng): Secoxyloganin絲/蘇蛋白激NEK1抗體包裝100g
端羥基右旋聚乳(重均分子量26-36萬(wàn))英文名稱(chēng): Sodium AcetateN-乙酰轉(zhuǎn)移8樣蛋白抗體包裝25g
端羥基右旋聚乳(重均分子量3-5.5萬(wàn))英文名稱(chēng): Sodium gluconate神經(jīng)調(diào)節(jié)肽S抗體包裝500g
端羥基右旋聚乳(重均分子量36-48萬(wàn))英文名稱(chēng): Sotalol hydrochloride分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體包裝100g
端羥基右旋聚乳(重均分子量48-73萬(wàn))英文名稱(chēng): Lacidipine神經(jīng)粘附蛋白NGN抗體包裝500g
端羥基右旋聚乳(重均分子量5.5-9萬(wàn))英文名稱(chēng): Lacidipine神經(jīng)蛋白Nav1抗體包裝1g
端羥基右旋聚乳(重均分子量73-102萬(wàn))英文名稱(chēng): Nicergoline軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子B受體抗體包裝250mg
端羥基右旋聚乳(重均分子量9-17萬(wàn))英文名稱(chēng): Xylometazoline hydrochloride核受體0相關(guān)蛋白B家族2抗體包裝25ml
端羥基聚乳(重均分子量0.3-1.5萬(wàn))英文名稱(chēng): Xylometazoline hydrochloride磷化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體包裝5ml
端羥基聚乳(重均分子量1.5-3萬(wàn))英文名稱(chēng): Potassium Dihydrogen Phosphate天冬蛋白ASP4抗體包裝100g
端羥基聚乳(重均分子量102-137萬(wàn))英文名稱(chēng): Vincamine肉豆蔻?;D(zhuǎn)移2-N端肽抗體包裝500g
端羥基聚乳(重均分子量137-170萬(wàn))英文名稱(chēng): Imidapril Hydrochloride核因子活化T胞漿蛋白2抗體包裝100g
端羥基聚乳(重均分子量17-26萬(wàn))英文名稱(chēng): Piperaquine phosphate突觸粘附分子1抗體包裝25g
端羥基聚乳(重均分子量170-206萬(wàn))英文名稱(chēng): Cisapride Monohydrate核孔糖蛋白P62抗體包裝1g