公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):誘導(dǎo)型NO合成酶抑制劑(L-NIL)
英文名稱(chēng):L-NIL
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
L-NIL是有效和選擇性的誘導(dǎo)型NO合成酶(NO synthase)抑制劑,對(duì)小鼠誘導(dǎo)型NO合成酶和大鼠腦組成型NO合成酶的IC50值分別為3.3和92μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):53774-63-3 純度:99.26% 分子量:187.24 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
檸檬節(jié)桿菌Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白Human ARL13A (ADP-ribosylation factor-like protein 13A) ELISA KIT貓生長(zhǎng)激(GH)免疫試劑盒
木賊鐮刀菌胰腺衍生因子抗體Human ACVR2A (Activin receptor type-2A) ELISA KIT貓狀腺原(T3)免疫試劑盒
猴頭99補(bǔ)體因子H抗體Human ARL6IP5 (PRA1 family protein 3) ELISA KIT貓腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)免疫試劑盒
日光鹽場(chǎng)喜鹽芽孢桿菌磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體Human BDH2 (3-hydroxybutyrate dehydrogenase type 2) ELISA KIT貓窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
空腸彎曲桿菌Fas相關(guān)1因子抗體Human ART1 (GPI-linked NAD(P)(+)–arginine ADP-ribosyltransferase 1) ELISA KIT貓甲狀腺(T4)免疫試劑盒
馬來(lái)西亞鏈霉菌磷化粘著斑激抗體Human AWAT1 (Acyl-CoA wax alcohol acyltransferase 1) ELISA KIT貓甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
糙皮側(cè)耳纖維生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體Human HMGCLL1 (3-hydroxymethyl-3-methylglutaryl-CoA lyase, cytoplasmic) ELISA KIT貓黃體生成(LH)免疫試劑盒
華盛頓腥擲孢菌FBXO24蛋白抗體Human HIBADH (3-hydroxyisobutyrate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA KIT貓睪(T)免疫試劑盒
釀酒酵母FBXO27蛋白抗體Human BCKDK ([3-methyl-2-oxobutanoate dehydrogenase [lipoamide]] kinase, mitochondrial) ELISA KIT貓多巴(DA)免疫試劑盒
皺褶青霉FBXO4蛋白抗體Human ZSCAN5A ELISA Kit貓單核趨化蛋白1(MCP-1)免疫試劑盒
硬結(jié)節(jié)桿菌成纖維生長(zhǎng)因子受體3抗體Human TRPV1(Transient receptor potential cation channel subfamily V member 1) ELISA Kit貓促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
杜搟氏菌屬FAM71D蛋白抗體Human HYAL1(Hyaluronidase-1) ELISA Kit貓雌二(E2)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌F-box蛋白相關(guān)蛋白33抗體Human ZW10 ELISA Kit貓表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒
酒色紅菇FBXL16蛋白抗體Human ZWINT ELISA Kit貓白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
淡紫擬青霉FBXL20蛋白抗體Human DHCR24 (Delta(24)-sterol reductase) ELISA KIT貓白介6受體(IL-6R)免疫試劑盒
變異鹽單胞菌FBXL15蛋白抗體Human SCG3(Secretogranin-3) ELISA Kit貓白介6(IL-6)免疫試劑盒
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品表白樺脂
綠針假單胞菌Pseudomonas│chlororaphis 質(zhì)量規(guī)格:助濾劑,碳鈉處理,通量煅燒L-
致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:用于總膳食纖維含量分析,TDF-100AD-半乳糖
誘導(dǎo)型NO合成酶抑制劑(L-NIL)香草(熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Milnacipran雙特異性磷2抗體包裝10MG
香蘭,香草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tetrabenazine21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體包裝250mg
香葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tetrabenazine同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體包裝1g
消旋卡多曲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): VigabatrinDVL3蛋白抗體包裝1g
消旋瑞格列奈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): O-Desmethylvenlaine(DL)DNA依賴(lài)蛋白激催化亞基抗體包裝250mg
消旋山莨菪堿雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): FlumethasoneGADD153抗體包裝1g
消旋鹽替羅非班(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Flumethasone中間絲蛋白β-synemin抗體包裝250mg
硝地平雜質(zhì)ⅠI(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ritodrine HClMAP激激活死亡域蛋白4C抗體包裝1g
硝地平雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ritodrine HCl橋粒糖蛋白4抗體包裝1g
硝呋酚酰肼;硝呋奇特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Indinavir sulfate動(dòng)力蛋白3抗體包裝5g
硝呋太爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tazobactam sodiumδ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)/δ鏈接(δ-catenin)抗體包裝100ml
硝基呋喃烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tazobactam sodium胞漿接頭蛋白Dok6抗體包裝1g
硝普鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Cycloserine胞漿接頭蛋白Dok5抗體包裝25g
硝奧昔康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Cycloserine癌中心體相關(guān)蛋白抗體包裝5g
硝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tetracycline hydrochlorideDCAF13蛋白抗體包裝1g