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CCCP(50mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑

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更新時(shí)間:2022-04-21 12:17:19瀏覽次數(shù):266

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100μl
貨號(hào) GOY-01X9633 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
CCCP(50mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑公司正在出售的產(chǎn)品:CLEC5A/MDL1 C型凝集結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體庚酯 ≥99%, FCC, FG
LAMP-3/DC-LAMP/CD208 CD208抗體庚酯 AR,98.5%
DC-SIGN/CD209 間粘附分子非整合蛋白3抗體辛酯 Standard for GC,>99%(GC)
DC-SIGNR/CD299 CD299抗體辛酯 99%

詳細(xì)介紹

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

CCCP(50mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑


100μl

1~3天


商品介紹:

本品是溶于DMSO的CCCP溶液,濃度為50mM,體積為100μl(相當(dāng)于1mg的總量),常用作一種陽(yáng)性對(duì)照來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并配合線粒體膜電位檢測(cè)探針JC-1(貨號(hào)SY0488)或者JC-10(貨號(hào)SY0490)來(lái)進(jìn)行相關(guān)研究。

CCCP,即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,一種質(zhì)子載體(H+ ionophore),是一種強(qiáng)效的線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑,促使線粒體內(nèi)膜對(duì)H+產(chǎn)生通透性,導(dǎo)致線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的膜電位喪失,誘導(dǎo)凋亡發(fā)生。也可作用于葉綠體膜,抑制光合作用;CCCP還可抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體(ER-Golgi)之間的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn),高親和力結(jié)合細(xì)胞色素氧化酶。

CCCP還具有其他功能:

1)在牛蛙交感神經(jīng)方面的實(shí)驗(yàn)表明,CCCP 可增強(qiáng)促黃體生成素釋放激素的釋放;

2)作為一種質(zhì)子導(dǎo)體在葡萄糖存在的情況下影響E.coli 細(xì)胞活性;

3)對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣水平的各種調(diào)節(jié)效應(yīng);

4)抑制脂肝酶的分泌;

5)部分抑制pH梯度活化的Cl-攝取以及刷狀緣膜的Cl-/Cl-交換等。

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期12個(gè)月

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè):

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
尿激型纖溶原激活因子受體(uPAR)英文名稱:uPAR ELISA Kit脫羧蛋白體36抗體包裝500mg

尿激型纖溶原激活因子(uPA)英文名稱:uPA ELISA Kit間隙連接蛋白40抗體包裝25g

鳥(niǎo)苷環(huán)化激活因子2A(GUCA2A)英文名稱:GUCA2A ELISA Kit間隙連接蛋白43抗體包裝5g

鳥(niǎo)脫羧(ODC)英文名稱:ODC ELISA Kit間隙連接蛋白45抗體包裝100g

黏膜地址細(xì)胞黏附分子(MAdCAM1)英文名稱:MAdCAM1 ELISA Kit表面趨化因子受體1抗體包裝25g

尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷氧化4(NOX4)英文名稱:NOX4 ELISA Kit色P450單氧化抗體包裝500g

尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷氧化1(NOX1)英文名稱:NOX1 ELISA Kit色C抗體包裝1g

尼克酰胺-N-基轉(zhuǎn)移(NNMT)英文名稱:NNMT ELISA Kit角蛋白1抗體包裝1g

內(nèi)脂(VF)英文名稱:VF ELISA Kit巨病PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體包裝1g

內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制因子(Vaspin)英文名稱:Vaspin ELISA Kit周期C抗體包裝5g

內(nèi)皮脂肪(LIPG)英文名稱:LIPG ELISA Kit周期B1抗體包裝1g

內(nèi)皮抑(ES)英文名稱:ES ELISA Kit球蛋白抗體包裝1g

內(nèi)皮型一氧化氮合(NOS3)英文名稱:NOS3 ELISA Kit周期D1抗體包裝1g

內(nèi)皮細(xì)胞TEK酪激(Tie2)英文名稱:Tie2 ELISA Kit周期D2抗體包裝5g

內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1(ECE1)英文名稱:ECE1 ELISA Kit周期E抗體包裝25g

: A272資源名稱: 假諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格:≥85%,BR腫瘤壞死因子β試劑盒紫云英苷;astragalin

短小盒菌Parvularcula│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度大于98%腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化試劑盒知母皂苷A-Ⅲ;Timosaponin

芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度> 99%腫瘤壞死因子α試劑盒樟腦;Camphor
CCCP(50mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑大腸埃希氏 3′-氯苯乙酮乙脫氫Elisa

猴頭—50043 3-(1-萘基)烯酸乙脫氫Elisa

米羅布里格小單孢 4,5-二氟-2-乙脫氫2Elisa

米曲霉 二甲酚乙脫氫家族1-A3Elisa

蘇云金芽孢桿 2-甲?;夤鹚嵋阴oA羧化Elisa

大腸埃希 1-Boc-3-酮乙酰CoA羧化1Elisa

西西布哈加瓦氏 5-氯-2,4-二氟乙酰膽堿Elisa

谷氨酸棒狀桿ATCC13032 N-1-Boc-2-哌甲酸甲酯乙酰膽堿受體抗體Elisa

米根霉 4-乙烯基-4'-戊基二環(huán)己烷乙酰膽堿酯Elisa

慢生根瘤 1-N-Boc-4-氧代-3-羧酸乙酯乙酰膽堿酯抗體Elisa

變異短波單胞 奈韋拉平乙酰羧化Elisa

多粘芽孢桿 5,6-二氟苯并[c][1,2,5]噻二唑乙酰乙?;D(zhuǎn)移2Elisa

美澳型核果褐腐病 6-溴-4-羥基喹啉-3-甲酸乙酰肝Elisa

黑曲霉 華法林鈉(含異)乙型肝炎E抗原Elisa

平菇 1,4-二氨基蒽醌乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白Elisa

 


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