公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)
英文名稱(chēng):OSI-027
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
OSI-027是mTORC1和mTORC2選擇性抑制劑,IC50為22nM和65nM,比對(duì)PI3Kα,PI3Kβ,PI3Kγ和DNA-PK的抑制性高100倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):936890-98-1 純度:98.15% 分子量:406.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
矩圓黑盤(pán)孢腎結(jié)合蛋白抗體Anti-DKK2 Antibody載脂蛋白A2(APOA2)
科羅拉多擬無(wú)枝菌RET指蛋白樣2/3抗體Anti-DLD Antibody(PB0608)載脂蛋白A1(APOA1)
釀酒酵母RFESD蛋白抗體Anti-DLG1 Antibody(PB0592)甾-O-?;D(zhuǎn)移2(SOAT2)
灰色鏈霉菌灰色亞種胰島再生因子β抗體Anti-DLG4 Antibody甾-O-酰基轉(zhuǎn)移1(SOAT1)
莢膜紅細(xì)菌環(huán)指蛋白160抗體Anti-DLG3 Antibody運(yùn)動(dòng)因子相關(guān)蛋白1(MRP1)
微桿菌屬視黃脫氫13抗體Anti-DLG4 Antibody(PB0859)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白2(SMN2)
辣椒盤(pán)孢環(huán)指蛋白75抗體Anti-DLL1 Antibody孕烷X受體(PXR)
橙鱗傘8RIT1蛋白抗體Anti-DLL3 Antibody孕免疫調(diào)節(jié)結(jié)合因子1(PIBF1)
大腸埃希氏菌環(huán)指蛋白19B抗體Anti-DLL4 Antibody孕(Pg)
橙灰紫旋鏈霉菌胰島β生長(zhǎng)因子抗體Anti-DMRT1 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白4(TMOD4)
腸沙門(mén)氏菌腸亞種波恩血清型環(huán)指蛋白149抗體Anti-DNAJA2 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)
地衣芽孢桿菌心臟蛋白磷1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體Anti-DMD Antibody(PB0292)原肌球調(diào)節(jié)蛋白2(TMOD2)
烏洛托品甲速測(cè)管環(huán)指蛋白180抗體Anti-DNAJA1 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白1(TMOD1)
茶藨子葡萄座腔菌環(huán)指蛋白123抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白4(TPM4)
弗雷德里克斯堡假單胞菌軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白3(TPM3)
豇豆慢生根瘤菌環(huán)指蛋白210抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白2β(TPM2)
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
微小鏈霉菌Streptomyces│parvulus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
: 205234資源名稱(chēng): 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)冷海水黃桿 2-氨基-3-神經(jīng)型一氧化氮合成Elisa
乳白居真細(xì) 酚紅葡萄糖肉湯偽狂犬病病GPI抗體Elisa
Paraburkholderia contaminans 硝酸鹽肉湯偽狂犬病GB抗體Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 代硅烷偽狂犬病GE抗體Elisa
雞傷寒沙門(mén)氏 動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)熱休克蛋白90Elisa
煙色紅曲霉 木糖-明膠培養(yǎng)基圓環(huán)病Elisa
乳酸克魯維酵母 (4S,4'S)-2,2'-(戊烷-3,3'-二基)雙(4-芐基-4,5-二氫惡唑)副豬嗜血桿Elisa
天花板節(jié)桿 4-芐溴非洲豬瘟Elisa
玫瑰小雙孢 4-苯基-1,2,4-三唑烷-3,5-二酮口蹄疫A型抗體Elisa
Leucostoma niveum 4-聯(lián)苯結(jié)蛋白Elisa
匿名曲霉 芐基溴化鎂圓環(huán)病2型抗體Elisa
大腸埃希氏 3-甲氧基-1-轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子Elisa
可可鏈霉可可亞種 4-氟苯基乙硫生長(zhǎng)因子Elisa
生孢梭 檸檬酸酯清道夫受體Elisa
蘋(píng)果雙殼 5-基口蹄疫病IgA抗體Elisa