雙重酪氨酸激酶抑制劑(NVP-TAE 226)公司*的產(chǎn)品：NGF(Mouse Nerve growth factor) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子四化碳 光譜純, ≥99.0%
NT-3(Mouse Neurotrophin 3) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子3四化碳 紅外測(cè)油儀，≥99.0%
NT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：雙重酪氨酸激酶抑制劑(NVP-TAE 226)

英文名稱：NVP-TAE 226

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大腸埃希菌PE-Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgMAnti-SKA2 Antibody核仁磷蛋白(NPM)

香魚假單胞菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗猴IgMAnti-SKP2 Antibody核仁蛋白9(NOL9)

玉米  轉(zhuǎn)基因玉米 MIR162 品系PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-SKP2 Antibody核仁蛋白8(NOL8)

Bacillus subtilis WB800 (枯草芽孢桿菌WB800）PE-Cy3標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-SKP1 Antibody核仁蛋白7(NOL7)

芽孢桿菌屬PE-CY5標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-SLBP Antibody核仁蛋白6(NOL6)

球孢白僵菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGAnti-SLC10A1 Antibody核仁蛋白58(NOP58)

柔嫩艾美耳球蟲Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC10A1 Antibody(PB0788)核仁蛋白4(NOL4)

食菌屬Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC10A1 Antibody核仁蛋白3(NOL3)

淡色生赤殼PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC12A1 Antibody核仁蛋白14(NOL14)

果蔬汁 死蜱、菊酯、多效唑、 噠螨靈PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC11A1 Antibody核仁蛋白12(NOL12)

針孢鏈霉菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC12A1 Antibody(PB0436)核仁蛋白11(NOL11)

枯草芽孢桿菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC12A3 Antibody核仁蛋白10(NOL10)

菜豆擬莖點(diǎn)霉PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC14A1/UTE Antibody核仁蛋白1(NOL1)

腸桿菌屬PE-Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC12A6 Antibody核膜蛋白(NRM)

工業(yè)堿速測(cè)包（用于水發(fā)產(chǎn)品）PE-CY5標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC12A2 Antibody核連蛋白2(NUCB2)

立枯絲核菌APC標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC12A5 Antibody核連蛋白1(NUCB1)

黑色瘤硫軟骨蛋白多糖4抗體羅倫氏隱球酵母大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物

NDST1蛋白抗體惡臭醋桿菌大鼠心肌成纖維細(xì)胞提取物

神經(jīng)元1抗體金黃色葡萄球菌金黃色亞種大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物胞

指趾關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白抗體阿舒假囊酵母大鼠食管平滑肌細(xì)胞提取物
雙重酪氨酸激酶抑制劑(NVP-TAE 226)海膽鞘氨單胞 二苯鹽酸鹽

稻生擲孢酵母 6-甲氧基-7-異戊烯氧基

楷米干酪 青蒿琥酯

疣梗青霉 夫西地酸

枯草芽孢桿 槐黃烷酮C

淡紫紫霉 2,6-二甲氧基-4-乙基

大腸埃希氏○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○74 當(dāng)歸多糖

釀酒酵母 4-基-2,6-二甲氧基

枯草芽孢桿 己唑

栗酒裂殖酵母 (±)-松屬

大栓孔 異原莪述烯

產(chǎn)氣莢膜梭       C型 二苯甲

叢毛紅曲  安賽蜜

酵母 郁金二酮

地衣芽孢桿 4-羥基苯甲酰肼 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)