商品介紹:
Reversine是一種ATP-競(jìng)爭(zhēng)性的Aurora kinase抑制劑,作用于Aurora A,Aurora B和Aurora C,IC50分別為400,500和400nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):656820-32-5 純度:99.25% 分子量:393.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Aurora激酶抑制劑(Reversine)
英文名稱:Reversine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸埃希菌轉(zhuǎn)導(dǎo)β樣蛋白1抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉(zhuǎn)移1(CHST1)
土壤德沃斯氏菌絲/蘇激TLK2抗體Anti-IL18 Antibody糖合3(CHSY3)
居真菌細(xì)菌硫氧環(huán)蛋白還原1抗體Anti-IL1B Antibody糖合1(CHSY1)
Compostimonas跨膜蛋白173抗體Anti-IL18 Antibody糖蛋白M6B(GPM6B)
大腸埃希氏桿菌跨膜蛋白147抗體Anti-IL18 Antibody(PB0057)糖蛋白M6A(GPM6A)
諾卡氏菌Ten-eleven轉(zhuǎn)運(yùn)基因1蛋白抗體Anti-IL18 Antibody糖蛋白A33(GPA33)
矩圓黑盤孢四分子交聯(lián)體5抗體(四旋蛋白)Anti-IL18 Antibody糖蛋白Ⅴ(GP5)
銅綠假單胞菌四分子交聯(lián)體6抗體(四旋蛋白)Anti-IL18 Antibody羰基還原4(CBR4)
淀粉產(chǎn)色鏈霉菌T急性淋巴母白血病相關(guān)抗原1抗體Anti-IL1B Antibody羰基還原3(CBR3)
Bacillus aryabhattaiTM4SF3蛋白抗體Anti-IL1B Antibody羰基還原1(CBR1)
猴頭四分子交聯(lián)體10抗體(四旋蛋白)Anti-IL1B Antibody碳酐Ⅻ(CA12)
黃曲霉四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白抗體Anti-IL1B Antibody碳酐Ⅸ(CA9)
蘇云金芽孢桿菌四分子交聯(lián)體12抗體(四旋蛋白)Anti-IL1R1 Antibody碳酐Ⅵ(CA6)
傘形卷霉四分子交聯(lián)體13抗體(四旋蛋白)Anti-IL1RN Antibody碳酐ⅤB(CA5B)
日本根霉四分子交聯(lián)體16抗體(四旋蛋白)Anti-IL1F10 Antibody碳酐Ⅳ(CA4)
多主棒孢霉四分子交聯(lián)體20抗體(四旋蛋白)Anti-IL1F10 Antibody碳酐Ⅲ(CA3)
溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體化膿性鏈球菌(釀膿鏈球菌)小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞
SNX27蛋白抗體腐皮鐮孢(斜面)小鼠腎小管上皮細(xì)胞
細(xì)胞周期G2/M期快速誘導(dǎo)蛋白SPDYA抗體費(fèi)舍爾弧菌小鼠腎足突細(xì)胞
S100A2抗體環(huán)狀芽胞桿菌小鼠腎成纖維細(xì)胞
Aurora激酶抑制劑(Reversine)模擬乳粉克羅諾桿質(zhì)控樣品(定性) 1,4-哌二乙磺酸單鈉色P450Elisa
滑假絲酵母 鑭、鈰、鐠、釹、釤、釔/La, Ce, Pr, Nd, Sm, Y1-磷酸鞘氨Elisa
地中海新殼梭孢 鍺、銻、錫、鍶、鈦、釩/Ge, Sb, Sn, Sr, Ti, V早孕因子蛋白Elisa
靈芝 氨曲南圓環(huán)病3型Elisa
擬盤多毛屬 氟、、溴、硫酸根、硝酸根、 亞硝酸根/F, Cl, Br, NO2, NO3,SO4葡萄糖依賴性胰島釋放多肽Elisa
扣囊復(fù)膜孢酵母 洛莫司汀豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子αElisa
蔬菜芽孢桿 銅、錳、鉬、鎳、鉛、鋅/Cu, Mn, Mo, Ni, Pb, Zn胸腺β4Elisa
小鏈桿屬 N-芐基哌總膽汁酸Elisa
海濱鹽紅 鈷、鉻、鐵、錳、鈉、鎳/Co, Cr, Fe, Mn, Na, Ni水泡性口炎抗體Elisa
落花生短胖孢 鎘、銅、鐵、錳、鉛、鋅/Cd, Cu, Fe, Mn, Pb, Zn孕Elisa
亮白曲霉 鎘、鉻、銅、鎳、鉛、鋅/Cd, Cr, Cu, Ni, Pb, Zn17β-雌二Elisa
杰丁塞伯林德納氏酵母 鈣、、鋰、鎂、鈉、銨/Ca, K, Li, Mg, Na, NH4白介6Elisa
枯草芽孢桿 鈣、、鋰、鎂、鈉、銨/Ca, K, Li, Mg, Na, NH4白介8Elisa
巨大芽孢桿 鉍、鍺、銦、鋰、鈧、釔/Bi, Ge, In, Li, Sc, Y白介1βElisa
Sphingomonas adhaesiva 鉍、鍺、銦、銥、鋰、鈧/Bi, Ge, In, Ir, Li, Sc腫瘤壞死因子αElisa