以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
ST2825是一種MyD88同源二聚化抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):894787-30-5 純度:99.51% 分子量:591.51 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
香蒲新苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nardosinone載脂蛋白AI調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝100g
香薷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Praeruptorin B黑色瘤硫軟骨蛋白多糖抗體包裝25g
香葉木-7-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Atractylenolide II核蛋白易位啟動(dòng)子區(qū)域TPR抗體包裝500g
香葉木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clinodiside A核因子1X抗體包裝100mg
香櫞(枸櫞)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sauchinone環(huán)指蛋白107抗體包裝1g
香櫞(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Emodin-8-glucoside軸突生長誘向因子G1配體抗體包裝250mg
香紫蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isoliensinine神經(jīng)前體表達(dá)發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體包裝100g
香紫蘇內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liensinine Perchlorate軸突生長誘向因子4抗體包裝25g
襄五脂英文名稱: 3-Butylidenephthalideγ-分泌組件蛋白NCLN抗體包裝500g
消旋山莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pachymic acid核受體蛋白NR2E3抗體包裝100g
小白菊內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Corilagin絲/蘇蛋白激NEK8抗體包裝25g
小駁骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside F3核孔蛋白Nup37抗體包裝500g
小檗紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sophoridine核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體包裝500mg
小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Demethylzeylasteral核苷結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
小檗皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Harmine hydrochloride核苷結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)緊密連接蛋白1試劑盒柴胡皂苷B2;Saikosaponin
纖維堆囊菌Sorangium│cellulosum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1試劑盒甘草查爾;Echinatin
彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格:AR,98%金屬硫蛋白2試劑盒穿心蓮新苷 ;Neoandrograph
MyD88同源二聚化抑制劑(ST 2825)腫瘤/抗原2.3抗體T細(xì)胞表面糖蛋白CD3 epsilon鏈(CD3E/T3E)檢測試劑盒CD3E/T3E ELISA Kit
腫瘤/抗原2.4抗體T細(xì)胞白血病同源盒蛋白1(Tlx1/Hox11/Tlx-1)檢測試劑盒Tlx1/Hox11/Tlx-1 ELISA Kit
腦鈉/利鈉肽抗體Toll樣受體9(TLR-9/CD289)檢測試劑盒TLR-9/CD289 ELISA Kit
B Raf抗體Toll樣受體7(TLR7)檢測試劑盒TLR7 ELISA Kit
癌易感因1抗體Toll樣受體5(TLR-5)檢測試劑盒TLR-5 ELISA Kit
癌易感因2抗體TGF-β誘導(dǎo)早期因1(TIEG1)檢測試劑盒TIEG1 ELISA Kit
溴脫氧尿苷抗體Tau蛋白(TAU)檢測試劑盒TAU ELISA Kit
B遷移因2抗體Slit2(Slit2)檢測試劑盒Slit2 ELISA Kit
骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體SCAF11蛋白(SFRS2IP/CASP11)檢測試劑盒SFRS2IP/CASP11 ELISA Kit