以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Chidamide是一種HDAC抑制劑,抑制HDAC1,HDAC2,HDAC3和HDAC8,IC50分別為95,160,67和733nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:743420-02-2 別名:CS055;HBI-8000 純度:96.09% 分子量:390.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母磷化端粒逆轉錄抗體Anti-IL12A Antibody糖原磷化L(PYGL)
根瘤菌磷化結節(jié)性硬化癥蛋白1抗體Anti-IL10 Antibody糖原磷化B(PYGB)
馬氏副球菌磷化結節(jié)性硬化蛋白抗體Anti-IL11 Antibody糖原合激3β(GSK3β)
谷棒桿菌磷化結節(jié)性硬化蛋白抗體Anti-IL12B Antibody糖原合激3α(GSK3α)
中國臺灣根霉磷化結節(jié)性硬化蛋白抗體Anti-IL12B Antibody糖原蛋白2(GYG2)
根瘤菌磷化結節(jié)性硬化蛋白抗體Anti-IL12B Antibody糖原蛋白1(GYG1)
孟加拉副球菌磷化結節(jié)性硬化蛋白抗體Anti-IL12B Antibody糖基-2-磺基轉移(UST)
茄鏈格孢菌腫瘤壞死因子受體1抗體Anti-IL12B Antibody糖皮質激誘導腫瘤壞死因子受體(GITR)
鼠李糖乳桿菌腫瘤蛋白p53誘導蛋白13(腫瘤抑制基因)Anti-IL13 Antibody糖皮質激受體β(GRβ)
奇異酵母增生肉蛋白1抗體Anti-IL12RB1 Antibody糖皮質激受體α(GRα)
植物乳桿菌跨膜蛋白166抗體Anti-IL13 Antibody糖抗原72-4(CA72-4)
假單胞菌屬跨膜蛋白超家族9-1抗體Anti-IL13 Antibody糖抗原50(CA50)
裂褶菌腫瘤壞死因子配體超家族成員7抗體Anti-IL13 Antibody糖抗原242(CA242)
產(chǎn)二鏈霉菌結構蛋白家族3抗體Anti-IL13 Antibody糖抗原19-9(CA19-9)
鏈霉菌屬T淋巴受體α抗體Anti-IL13RA1 Antibody糖抗原15-3(CA15-3)
枯草芽孢桿菌選擇性胸腺相關蛋白抗體Anti-IL15 Antibody糖抗原125(CA125)
單核細胞蛋白5抗體結腸彎曲菌小鼠冠狀動脈內皮細胞
絲/精相關核基質蛋白1抗體花生根瘤菌小鼠心肌細胞(乳鼠)
絲/精相關核基質蛋白2抗體粘性放線菌小鼠腎小球內皮細胞
絲/蘇蛋白激SIK2抗體棕色固氮菌小鼠膀胱上皮細胞
HDAC抑制劑(Chidamide)松口蘑 金、鉬、銦、鈮、硅/Au, Mo, In, Nb, Si活性氮簇Elisa
團聚莖點霉 2-基吡啶鈣衛(wèi)蛋白Elisa
加納醋桿 砷、汞、鉛、碲、鈦/As, Hg, Pb, Te, Ti囊蟲病Elisa
枯草芽胞桿 5-甲氧基型肝炎病抗體Elisa
黑綠青霉 砷、鎘、銅、鉛、鋅/As, Cd, Cu, Pb, Zn口蹄疫病非結構蛋白3ABC抗體Elisa
中華游動微 環(huán)己酮肟抗肽PMAP-37Elisa
釀酒酵母 砷、鎘、銅、汞、鉛/As, Cd, Cu, Hg, PbL-色氨酸Elisa
包比利鏈霉 3-吡啶甲精合成Elisa
谷氨酸棒桿 砷、鉍、銅、鉛、銻/As, Bi, Cu, Pb, Sb亞精Elisa
燕麥鐮孢 3-基吡啶乙型肝炎病核心抗原Elisa
大腸埃希氏 鋁、鉍、鈷、鎂、釩/Al, Bi, Co, Mg, V乙型肝炎病表面抗原Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 A型 甲基三乙基化銨亮氨酸氨基肽Elisa
秦氏蜜環(huán) 鋁、鉍、鈷、鎂、釩/Al, Bi, Co, Mg, V前列腺F受體Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 4-基吡啶精Elisa
枯草芽孢桿 2,4,6-三氨基嘧啶β氨基己糖苷AElisa