磷酸二酯酶抑制劑(Papaverine)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Crk p38 (phospho Y221) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Crk p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化膜相關(guān)蛋白酪氨酸激酶Lyn抗體IgGMulti-class antibo

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

大腸埃希氏桿菌FAM129B蛋白抗體Human CAMSAP1 (Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1) ELISA KIT牛白介10(IL-10)免疫試劑盒

蟻巢傘屬微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human CAB39 (Calcium-binding protein 39) ELISA KIT牛白介1(IL-1)免疫試劑盒

秦氏蜜環(huán)菌FAM50A蛋白抗體Human BSDC1 (BSD domain-containing protein 1) ELISA KIT牛γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

紅緣擬層孔菌FAM113A蛋白抗體Human CASQ1 (Calsequestrin-1) ELISA KIT牛γ基丁(GABA)免疫試劑盒

FAM150A蛋白抗體Human C1GALT1C1 (C1GALT1-specific chaperone 1) ELISA KIT牛β-乳球蛋白(β-LG)(過(guò)敏原Bosd5)(LGB)免疫試劑盒

聚生殼菌FRMD8蛋白抗體Human NACC2 (Nucleus accumbens-associated protein 2) ELISA KIT牛β羥基丁脫氫(β-HBDH)免疫試劑盒

葡萄座腔菌FGFR1癌基因伴侶蛋白抗體Human P2RY12(P2Y purinoceptor 12) ELISA Kit牛β羥丁(βOHB)免疫試劑盒

多鏈霉菌FAM家族蛋白40A抗體Human CADPS2 (Calcium-dependent secretion activator 2) ELISA KIT牛β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒

黃曲霉FAM55D蛋白抗體Human CPPED1 (Serine/threonine-protein phosphatase CPPED1) ELISA KIT牛β干擾(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒

葡萄芽假絲酵母組織激活過(guò)氧化活化增生受體γ蛋白抗體Human CADPS (Calcium-dependent secretion activator 1) ELISA KIT牛β-防御(β-Defensins)免疫試劑盒

葡紫紅菇FAM21C蛋白抗體Human BOK (Bcl-2-related ovarian killer protein) ELISA KIT牛α乳清蛋白(α-La)免疫試劑盒

光滑青霉FAM13C1蛋白抗體Human BRAP (BRCA1-associated protein) ELISA KIT牛α晶體B鏈(CRYAB)免疫試劑盒

大腸埃希氏桿菌FAM59B蛋白抗體Human BCAR3 (Breast cancer anti-estrogen resistance protein 3) ELISA KIT牛α干擾(IFN-α)免疫試劑盒

解淀粉芽孢桿菌FAM59A蛋白抗體Human BFSP1 (Filensin) ELISA KIT牛α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒

根癌土壤桿菌FAM160B1蛋白抗體Human BSCL2 (Seipin) ELISA KIT牛P物質(zhì)(SP)免疫試劑盒

擬枝孢鐮孢FAM161B蛋白抗體Human BRI3BP (BRI3-binding protein) ELISA KIT牛N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒

立枯絲核菌Rhizoctonia│solani 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)茄尼

Oriloxodonta鏈球菌Streptococcus oriloxodontae Shinozaki-Kuwahara et al. 2014 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥98.5%(GC)千層紙

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.6%10-羥基癸烯
磷酸二酯酶抑制劑(Papaverine)性紅 73（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： *磷化D酪激衰減蛋白1抗體包裝1g

羧芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： N-Acetyl Neuraminic Acid/NANA/Neu5Ac/SA磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g

羧司坦（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Erythromycin磷化D酪激衰減蛋白1抗體包裝500g

他克莫司(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Erythromycin磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g

他扎羅?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dobutamine HCL磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝25g

他唑巴坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： HPCD磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100ml

他唑巴坦鈉 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Carboxymethyl chitosan磷化DNA基轉(zhuǎn)移1抗體包裝500ml

泰諾福韋;替諾福韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Enoxaparin sodium磷化DNA基轉(zhuǎn)移1抗體包裝100ml

酞丁安（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Enoxaparin sodium磷化DNA基轉(zhuǎn)移1抗體包裝500ml

坦度替尼（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Trimebutine maleate7脫氫膽固還原抗體包裝1g

碳鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Heparin sodium大腦發(fā)育同源蛋白2抗體包裝5g

糖精（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： HE-β-CD退行性精母同源物1抗體包裝1g

特比萘芬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nefopam HClDSCC1蛋白抗體包裝1g

特非那定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Methotrexate disodium 誘捕受體2抗體包裝100g

替比夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Methotrexate disodium DNA基轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體包裝25g