FLAP抑制劑(MK-0591)公司*的產(chǎn)品：Anti-FOXO3A/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子FOXO3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-NK-2R/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BTBD7 BTB/POZ結(jié)構(gòu)

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：FLAP抑制劑(MK-0591)

英文名稱(chēng)：MK-0591

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

淺灰綠色鏈霉菌磷化α-連環(huán)蛋白抗體Human GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit人葡萄糖6磷異構(gòu)(GPI)免疫試劑盒

白肉迷孔菌周期E2抗體Human GAD-Ab(Anti-Glutamic Acid Decarboxylase antibody) ELISA Kit人葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒

印度毛殼磷化鈣/鈣調(diào)依賴(lài)蛋白激CAMK2B/D/G抗體Human GAL12(Galectin 12) ELISA Kit人葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯(G-6-Pase)免疫試劑盒

煙管菌腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL8(Galectin 8) ELISA Kit人破傷風(fēng)(Tetanus)抗體(IgG)免疫試劑盒

蘋(píng)果鏈格孢（蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病菌）磷化腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL14(Galectin 14) ELISA Kit人蘋(píng)果脫氫1(MDH1)免疫試劑盒

貴州綠僵菌磷化CREB-1抗體Human GATA4(GATA Binding Protein 4) ELISA Kit人平滑肌肌動(dòng)蛋白(SMA)免疫試劑盒

土曲霉磷化CREB-1抗體Human GARS(Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit人嘌呤核苷磷化(PNP)免疫試劑盒

溜曲霉磷化周期依賴(lài)性激6抗體Human GCLM(Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit人脾臟酪激(Syk)免疫試劑盒

尖枝革菌原癌基因CBL2抗體Human GCSFR(Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit人皮質(zhì)抑/皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒

短鏈諾卡氏菌磷化原癌基因CBL2抗體Human GDF3(Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit人皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒

赤曲霉β鏈接相互作用蛋白1抗體Human fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit人皮質(zhì)-3(Cortxin-3)免疫試劑盒

臭紅菇磷化β鏈接相互作用蛋白1抗體Human GDF6(Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit人皮質(zhì)類(lèi)固結(jié)合球蛋白(CBG)免疫試劑盒

Pseudomonas fluorescens PfO-1磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human GDH/GLDH(Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit人皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

成團(tuán)泛菌葉綠體蛋白抗體（植物）Human GDF7(Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit人皮膚淋巴相關(guān)抗原(CLA)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體Human fT4(Free Thyroxine) ELISA Kit人皮膚蛋白(DPT)免疫試劑盒

放射形根瘤菌磷化絲切蛋白抗體Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人皮動(dòng)蛋白(CTTN)免疫試劑盒

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BSB淋巴抗原試劑盒次大風(fēng)子

鴨疫里氏桿菌Riemerella│anatipestifer 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRblca-4 ELISA Kit次

: IOCM30資源名稱(chēng): 豇豆慢生根瘤菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRblca-1 ELISA Kit催吐蘿芙木定
FLAP抑制劑(MK-0591)增殖潛能相關(guān)蛋白抗體包裝1g

RhoC抗體包裝25g

環(huán)指蛋白170抗體包裝5g

環(huán)指蛋白185抗體包裝1g

RHOG抗體包裝5g

RPS27A抗體包裝1g

核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體(核因子kB受體活化因子)包裝5g

維相關(guān)孤兒受體α抗體包裝250mg

呼吸道合胞病核蛋白抗體包裝25g

核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體包裝5g

RCCD1蛋白抗體包裝1g

磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體包裝250mg

磷化減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體包裝5g

ATP依賴(lài)解旋RENT1抗體包裝1g

Ras相關(guān)雌調(diào)節(jié)生長(zhǎng)抑制蛋白包裝25g 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)