公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:糖皮質(zhì)激素受體激動(dòng)劑(Dexamethasone)
英文名稱:Dexamethasone
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Dexamethasone是一種糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor)激動(dòng)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):50-02-2 別名:MK 125;NSC 34521;Prednisolone F 純度:98.70% 分子量:392.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
西青果(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Timosaponin BIIT激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝5g
西瑞香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2',3'-Dideoxyguanosine腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體包裝25g
西洋參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Anemarsaponin E軸突蛋白2抗體包裝5g
菥蓂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phytic acid腎小球粘附分子受體抗體包裝100g
溪黃草(線紋香茶菜)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polyphyllin I神經(jīng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝25g
豨薟草(豨薟)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polyphyllin II軸突生長(zhǎng)誘向因子G2抗體包裝1g
洗碗葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polyphyllin VI黑色瘤硫軟骨蛋白多糖4抗體包裝25g
喜馬拉雅紫茉莉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polyphyllin VIINDST1蛋白抗體包裝5g
喜樹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hyodeoxycholic acidEGR1結(jié)合蛋白2抗體包裝1g
細(xì)辛(北細(xì)辛)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hyodeoxycholic acid硝基化α-突觸核蛋白包裝250g
細(xì)辛脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Raddeanin ANK2轉(zhuǎn)錄樣蛋白B抗體包裝100g
細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Catalpol神經(jīng)正五聚體1抗體包裝25g
夏佛塔苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Shikonin核孔蛋白NUP160抗體包裝5g
夏枯草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithospermic acid核分離基因C蛋白抗體包裝1g
夏天無(wú)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Syringin磷化核分離基因C蛋白抗體包裝25g
貝葉多孔菌(灰樹花)Grifola│frondosa 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)精脒/精N試劑盒查斯曼寧堿;Chasmanine
高地芽孢桿菌Bacillus│altitudinis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品精合成試劑盒橙花叔; Nerolidol
: ivcas7.01130資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品精酰-tRNA合成試劑盒菖蒲;Shyobunone
糖皮質(zhì)激素受體激動(dòng)劑(Dexamethasone)中性粒彈性蛋白ELANE抗體紫草茸(標(biāo)準(zhǔn)品) TOK-001
型肝炎病NS4B(65kDa)抗體紫草,左旋紫草(標(biāo)準(zhǔn)品) Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside
神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體相關(guān)蛋白1抗體紫草(標(biāo)準(zhǔn)品) Pentoxifylline
死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體紫丁香酚苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Clebopride
神經(jīng)絲蛋白抗體紫河車(標(biāo)準(zhǔn)品) Buddlejasaponin Ivb
磷化核因子抗體紫花地?。?biāo)準(zhǔn)品) Erdosteine
跨膜受體蛋白Notch-1抗體紫花杜鵑(標(biāo)準(zhǔn)品) Pimecrolimus
磷化核受體Rev-Erbα抗體紫花前胡苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Torasemide
雞新城疫病抗體紫花前胡苷元 Naftopidil dihydrochloride