商品介紹:
Dasatinib hydrochloride是一種有效的AblWT/Src雙重抑制劑,IC50值分別為0.6nM/0.8nM;同時(shí)抑制c-KitWT/c-KitD816V,IC50值分別為79nM/37nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):854001-07-3 別名:BMS 354825 hydrochloride 純度:98.84% 分子量:524.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
AblWT/Src抑制劑 | Dasatinib hydrochloride | 1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
多變毛霉環(huán)指蛋白9抗體Anti-IGF2R Antibody同型半胱(HA)
芹側(cè)耳金屬蛋白組織抑制因子-1抗體(C端)Anti-IGFBP1 Antibody同線蛋白2(ST2)
大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○128表達(dá)蛋白19A抗體Anti-IGFBP1 Antibody同線蛋白1(ST1)
植物乳桿菌敏感性離子通道蛋白抗體Anti-IGFBP2 Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)
白僵菌胸腺基質(zhì)淋巴生成-1抗體Anti-IGFBP1 Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡF肽1(GTF2F1)
擬木荷生德克斯酵母骨架相關(guān)蛋白2抗體Anti-IGF2R Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡE肽1(GTF2E1)
小小鏈霉菌(微小鏈霉菌)轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體Anti-IGFBP2 Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡB(GTF2B)
短芽孢桿菌腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8Anti-IGFBP1 Antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA肽1(GTF2A1)
孢吸水鏈霉菌北京變種轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-IGFBP2 Antibody??康鞍?(DOK7)
竹黃*扭轉(zhuǎn)蛋白B抗體Anti-IGFBP3 Antibody??康鞍?(DOK6)
異常威克漢姆酵母巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白8抗體Anti-IGFBP3 Antibody??康鞍?(DOK5)
金灰青霉味覺受體蛋白家族2亞基7抗體Anti-IGFBP4 Antibody??康鞍?(DOK4)
大腸埃希氏菌味覺受體蛋白家族2亞基50抗體Anti-IGFBP3 Antibody(PB0748)停靠蛋白3(DOK3)
魚蛉假絲酵母扭轉(zhuǎn)原腸胚形成同源蛋白1抗體Anti-IGFBP5 Antibody??康鞍?(DOK2)
解淀粉堿單胞菌Tuftsin蛋白抗體Anti-IGFBP3 Antibody停靠蛋白1(DOK1)
立枯絲核菌跨膜蛋白161A抗體Anti-IGFBP5 Antibody鐵氧還蛋白還原(FDXR)
神經(jīng)元特異性蛋白3抗體靈芝(紅芝,赤芝)(斜面)小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞
細(xì)胞分化蛋白SEPT12抗體糙皮側(cè)耳、平菇(斜面)小鼠食管平滑肌細(xì)胞
細(xì)胞分化蛋白SEP1抗體巴西曲霉小鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞
細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體努比鹵地?zé)o氧芽孢桿菌小鼠心肌成纖維細(xì)胞
AblWT/Src抑制劑豌豆根瘤 金、銥、鈀、鉑/Au, Ir, Pd, Pt肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa
東方伊薩酵母 金、銥、鈀、鉑/Au, Ir, Pd, Pt鏈球7型Elisa
草酸青霉 金、銥、鈀、鉑/Au, Ir, Pd, Pt鏈球9型Elisa
釀酒酵母 金、銥、鈀、鉑/Au, Ir, Pd, Pt核糖核酸LElisa
腸沙門氏腸亞種嬰兒血清型 鋁、鐵、釩、鋅/Al, Fe, V, Zn黏病耐藥蛋白1Elisa
葡萄糖桿屬 鋁、銅、錳、鋅/Al, Cu, Mn, Zn維生AElisa
熱帶假絲酵母 鋁、鈣、鐵、鎂/Al, Ca, Fe, Mg番茄紅Elisa
腸沙門氏腸亞種伊斯特本血清型 鋁、鈣、鐵、鎂/Al, Ca, Fe, Mgβ-胡蘿卜Elisa
相思根瘤 鉬、銻、錫、鈦、鋯/Mo, Sb, Sn, Ti, Zr堿性蛋白Elisa
釀酒酵母 鎂、錳、鎳、鋅、硒/Mg, Mn, Ni, Zn, Se對(duì)氧磷1Elisa
寬雄腐霉 鑭、鈰、鐠、釹、釤/La, Ce, Pr, Nd, Sm對(duì)氧磷3Elisa
燼灰吸水鏈霉 銥、鈀、鉑、銠、釕/Ir, Pd, Pt, Rh, Ru對(duì)氧磷2Elisa
腐殖質(zhì)類芽胞桿 氟、、硝酸根、磷酸根、硫酸根/F, Cl, NO3, PO4, SO4酰基轉(zhuǎn)移Elisa
葡萄座腔 氟、、硝酸根、磷酸根、硫酸根/F, Cl, NO3, PO4, SO4堿性蛋白Elisa
松鼠葡萄球松鼠亞種 氟、、硝酸根、硝酸根、硫酸根/F, Cl, NO3, PO4, SO4乙酰CoA羧化1Elisa