產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HDAC廣譜抑制劑(PCI-24781)
英文名稱:PCI-24781
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PCI-24781(Abexinostat;CRA024781)是一種新的HDAC廣譜抑制劑,主要靶向HDAC1的Ki值為7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):783355-60-2 別名:CRA 024781;CRA 24781;Abexinostat 純度:97.94% 分子量:397.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鏈輪枝菌環(huán)指蛋白121抗體Anti-DCK Antibody粘蛋白5B(MUC5B)
假單胞菌屬環(huán)指蛋白169抗體Anti-DCN Antibody粘蛋白5AC(MUC5AC)
毛木耳環(huán)指蛋白113A抗體Anti-DCC Antibody粘蛋白4(MUC4)
枯草芽孢桿菌枯草亞種(現(xiàn)貨)環(huán)指蛋白43抗體Anti-DCN Antibody(PB0132)粘蛋白21(MUC21)
米舒青霉腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記蛋白2抗體Anti-DCN Antibody粘蛋白20(MUC20)
根瘤菌環(huán)指蛋白14抗體Anti-DCX Antibody粘蛋白17(MUC17)
新城疫病RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白A抗體Anti-DDAH1 Antibody粘蛋白13(MUC13)
楊樹(shù)菇絲蘇激1受體相互作用蛋白抗體Anti-DDAH2 Antibody粘蛋白12(MUC12)
布蘭克假絲酵母CASP2凋亡相關(guān)蛋白抗體Anti-DDB1 Antibody(PB0607)粘蛋白1(MUC1)
瑞士乳桿菌DNA修復(fù)和重組蛋白R(shí)AD54B抗體Anti-DDB2 Antibody增殖關(guān)聯(lián)蛋白2G4(PA2G4)
玉蜀黍赤霉菌畸胎瘤癌基因RAS相關(guān)病抗體Anti-DDIT3 Antibody造血蛋白1(HEM1)
乳乳球菌霍氏亞種Ras-GTP激活蛋白3抗體Anti-DDB2 Antibody造血蛋白(HEMGN)
神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白抗體Anti-DDR1 Antibody造骨鈣黏蛋白(CDHOB)
接骨木鐮孢視黃脫氫11/型肝炎病核心蛋白抗體Anti-DDR1 Antibody皂(Haponin)
釀酒酵母維甲相關(guān)孤兒受體β抗體Anti-DDR2 Antibody早幼粒白血病蛋白(PML)
黃綠木霉G蛋白GTP-GDP解離激因子1抗體Anti-DDT Antibody早期生長(zhǎng)應(yīng)答因子4(EGR4)
ATCC9372資源名稱: 芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:BR,98.5%
灰平鏈霉菌Streptomyces│griseoplanus Backus et al. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
柳樹(shù)爛皮病Cytospora│salicis (Corda) Rabenh. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HDAC廣譜抑制劑(PCI-24781)粘綠木霉 氣單胞培養(yǎng)基添加劑血管生成受體酪氨酸激2Elisa
豬苓 CDC厭氧瓊脂血管性血友病因子Elisa
釀酒酵母 2,3,3-基假血栓A2Elisa
淡紫灰鏈霉 三號(hào)膽鹽血小板衍生生長(zhǎng)因子Elisa
假單胞 四甲基氟代脲六氟磷酸酯牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1Elisa
聚生殼 牛心浸粉煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸Elisa
瑞士乳桿 肝浸粉氧化型Elisa
球孢白僵 牛膽鹽一氧化氮Elisa
稻瘟病(都不提供) 酸水解酪蛋白一氧化氮合成Elisa
衛(wèi)茅膏藥病 多價(jià)蛋白胨胰蛋白Elisa
綠色木霉=木木霉 特殊蛋白胨胰島Elisa
灰紫毛霉 5--2-(易)胰島樣生長(zhǎng)因子1Elisa
波蘭青霉 去氧膽酸鈉胰島原Elisa
嬰兒配方乳粉 、肉堿、?;撬?、肌 瑞氏染色液胰高血糖Elisa
杰氏假單胞 (R)-1-苯基-1,2-乙二胰高血糖樣肽1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)