IRS-1/2抑制劑(NT157)公司正在出售的產(chǎn)品：5-NT(Mouse 5-Nucleotidase) ELISA Kit 小鼠5核苷硝銅，三水 99.99% metals basis
CD19(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD19分子硝銅，三水 ACS，98.0-102.0%
CD3(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD3分子硝銅

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

茶葉  鈧、釔、鑭  PE標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SHP-1(PTPN6) Antibody核糖核A6(RNASE6)

黑綠木霉Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHP-1(PTPN6) Antibody核糖核A4(RNASE4)

煙曲霉生物標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-SHP1/PTPN6 Antibody核糖核A3(RNASE3)

耐輻射奇球菌突變株PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SI Antibody核糖核A2(RNASE2)

多粘類芽胞桿菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SIDT1 Antibody核糖核A13(RNASE13)

群生殼菌PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SIRT1 Antibody核糖核A12(RNASE12)

硝基還原假單胞菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SIRT1 Antibody核糖核A11(RNASE11)

弗氏鏈霉菌生物標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIRT2 Antibody(PB0174)核糖核A10(RNASE10)

香菇Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgMAnti-SIRT4 Antibody核糖核A(RNASE1)

米根霉PE標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIRT6 Antibody(PB0375)核糖核Ⅲ(RNASEN)

禽腺病PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIRT3 Antibody核外切1(EXO1)

燦爛類芽胞桿菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIX1 Antibody核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)

游動(dòng)放線菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIX3 Antibody核受體相關(guān)蛋白1(NURR1)

茄腐鐮刀菌PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈Anti-SIRT7 Antibody(PB0376)核仁(NCL)

詹森青霉FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-SIX6 Antibody核仁磷蛋白3(NPM3)

豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS17辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈Anti-SKAP1 Antibody核仁磷蛋白2(NPM2)

絲或半胱蛋白水解抑制蛋白1抗體固氮菌屬大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物

跨膜硫軟骨蛋白聚糖C抗體克氏梭菌大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物

神經(jīng)腫瘤Nova1抗原抗體簇孢匍柄霉大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞提取物

突觸細(xì)胞粘附分子3抗體短柄帚霉大鼠腸微血管細(xì)胞提取物
IRS-1/2抑制劑(NT157)狹孢鐮刀 聚乙烯吡咯烷酮

帚狀云南霉 5,7-二甲氧基黃烷酮

藤黃節(jié)桿 黃卡瓦胡椒B

醋化醋桿 胱

孔雀石鏈霉 5，6-二氫甲氧醉椒

Bifidobacterium adolescentis 2,7-二羥基萘

雪白金針菇 赤式-2-(4-烯基-2,6-二甲氧基苯氧基)-1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-烷-1-

尖孢鐮孢* 脫氧膽酸鈉（豬）

釀酒酵母 醉椒

黃曲霉 原莪述烯

枯草芽孢桿 鹽酸曲唑酮

大腸埃希氏 L-木糖

單胞 異香蘭

芥黃蜜環(huán) 熊果酸

中國臺(tái)灣相思根瘤 人參皂苷Rk2