商品介紹:
SU9516是一種有效的CDK2抑制劑,IC50值為22nM,同時(shí)對(duì)CDK1和CDK4也有抑制作用,IC50值分別為40和200nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):377090-84-1 純度:99.76% 分子量:241.25 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CDK2抑制劑(SU9516) | SU9516 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
多粘類芽孢桿菌大鼠抑制BAnti-RHOG Antibody人他克莫司(FK506)
礦泉水中砷質(zhì)控樣品人甲狀腺肽激抗體Anti-RHPN1 Antibody人他克莫司(FK506)
肺炎克雷伯氏菌大鼠胰島受體βAnti-RIMKLA Antibody人上皮特異性抗原(ESA)
鴨艾耳球蟲小鼠T活化連接蛋白Anti-RIMS4 Antibody人上皮特異性抗原(ESA)
黑曲霉人抗類固生成抗體Anti-RIMKLB Antibody人上皮膜抗原(EMA)
灰樹花人粒特異性抗核抗體Anti-RIMS4 Antibody人上皮膜抗原(EMA)
糙孢籃狀菌小鼠抗內(nèi)膜抗體Anti-RIN1 Antibody人凝聚(CLU)
哈茨木霉大鼠糖化血紅蛋白A1cAnti-RIOK3 Antibody人凝聚(CLU)
松口蘑小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物Anti-RIT1 Antibody人OJ抗體/抗異亮酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)
小白側(cè)耳大鼠淋巴功能相關(guān)抗原3Anti-RIT1 Antibody人OJ抗體/抗異亮酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)
地衣芽孢桿菌人抗信號(hào)識(shí)別顆??贵wAnti-RIN3 Antibody人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)
球孢白僵菌人封閉抗體Anti-RNASE3 Antibody人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)
細(xì)枝孢小鼠解脲脲原體抗體Anti-RNF113B Antibody人肌生成(MYOG)
大腸桿菌大鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1Anti-RNF111 Antibody人肌生成(MYOG)
膠凍樣芽胞桿菌人抗膜DNA抗體Anti-RNF125 Antibody人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)
大腸埃希菌小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白Anti-RNF130 Antibody人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)
四分子交聯(lián)體5抗體四旋蛋白蟬花1-13(斜面)人源性腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞舒尼替尼耐藥株
四分子交聯(lián)體6抗體四旋蛋白糙皮側(cè)耳(平菇)(斜面)人卵巢癌紫杉耐藥株
T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原1抗體可可毛色二孢菌(斜面)人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞長(zhǎng)春新堿耐藥株
TM4SF3蛋白抗體紅鬼筆人宮頸癌多藥耐藥細(xì)胞
CDK2抑制劑(SU9516)解脂亞羅酵母 3,5-二-L-甲腺
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 肌酐
巴斯德畢赤酵母 一水肌酸
尖孢鐮孢 L-甘-酪二肽
淡紫灰吸水鏈霉 N-乙酰-L-谷氨酰
銅綠假單胞 S-羧甲基-L-半胱
ATCC 29194 L-甲狀腺鈉
新硬毛革耳 L-甲狀腺
阿達(dá)青霉 多巴
猴頭 L-肌肽
大腸埃希 組
麥斯塔脫硫桿 組
ATCC 33028 磷酸組
鴨疫里氏桿 還原型
比勒陀尼亞擬無枝酸 氧化型