公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK1/JAK2抑制劑(Baricitinib)
英文名稱:Baricitinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Baricitinib是一種選擇性的JAK1/JAK2抑制劑,IC50分別為5.9nM和5.7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1187594-09-7 別名:INCB028050;LY3009104 純度:99.70% 分子量:371.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
兔耳草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Coptisine chloride三聚抗體包裝25g
菟絲子(南方菟絲)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lycorine chloride磷化雷帕霉靶蛋白抗體包裝5g
蛻皮激(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Betaine hydrochloride黑皮質(zhì)-1受體抗體包裝1g
脫落(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Berbamine hydrochloride胃動(dòng)抗體包裝25g
脫氫齒孔英文名稱: Leonurine hydrochloride甘露聚糖結(jié)合凝集抗體包裝5g
脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Myricetrin膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體包裝100g
脫穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tectochrysin結(jié)核分枝桿菌Ag85B抗體包裝25g
脫穿心蓮內(nèi)酯琥珀半酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Senkyunolide A磷化微管相關(guān)蛋白4抗體包裝5g
脫羊藿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxysophocarpine磷化微管相關(guān)蛋白4抗體包裝100g
脫氧熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Belinostat (PXD101)人痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體包裝25g
脫氧野尻霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxypeucedanin黑色瘤相關(guān)抗原G1/肝癌相關(guān)蛋白4抗體包裝25g
拓?fù)涮婵蝶}鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Crotaline;Monocrotaline黑色瘤相關(guān)抗原B6抗體包裝5g
瓦松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Scularin黑色瘤相關(guān)抗原C2抗體包裝1g
萬丈深(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Scularein黑色瘤抗原樣基因2抗體包裝25g
萬丈深(綠莖還陽參)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester黑色瘤相關(guān)抗原C1抗體包裝5g
尖鐮孢古巴?;停ㄏ憬犊菸【?/span>Fusarium│oxysporum 質(zhì)量規(guī)格:純度≥99.0%,BR,可用于培養(yǎng)巨噬移動(dòng)抑制因子試劑盒橙黃決明-6-葡萄糖苷;
: 387資源名稱: 赭褐鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR巨噬炎性蛋白5試劑盒次大風(fēng)子;Hydnocarpin
中華單頂孢Monacrosporium│sinense 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定巨噬炎性蛋白3β試劑盒醋棉酚;Gossypol-acetic
JAK1/JAK2抑制劑(Baricitinib)中期因子/肝結(jié)合生長因子抗體馬兜鈴D Xylitol
鹽皮質(zhì)激受體抗體馬兜鈴II Xylitol
促黑激α抗體馬蘭草(標(biāo)準(zhǔn)品) 2',3'-Dideoxythymidine
Myc因相關(guān)X因子抗體馬尿泡(標(biāo)準(zhǔn)品) ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE
凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體馬錢苷;馬錢子苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Aminocyclohexanol
NFKB激活蛋白1抗體馬錢苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Y27632
磷化Myc因相關(guān)X因子抗體馬錢子(標(biāo)準(zhǔn)品) Ganoderic acid A
亞四氫葉還原MTHFR抗體螞蟻(棕褐蟻)(標(biāo)準(zhǔn)品) Daurisoline
MEK1/MAPKK1抗體(N-端)買麻藤(小葉買麻藤)(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-(Bromomethyl)naphthalene