產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):ALDH1抑制劑(Disulfiram)
英文名稱(chēng):Disulfiram
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Disulfiram是特異性的乙醛脫氫酶1型抗體(ALDH1)抑制劑,可以通過(guò)對(duì)酒精產(chǎn)生急性敏感性來(lái)治療慢性酗酒。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):97-77-8 別名:Tetraethylthiuram disulfide;TETD 純度:98.13% 分子式:C??H??N?S? 分子量:296.54 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
殼菌同源盒基因HOXA3蛋白抗體Human STK32B ELISA Kit大鼠肝X受體β(LXRβ)免疫試劑盒
谷棒桿菌同源盒基因HOXA4蛋白抗體Human STK33 ELISA Kit大鼠肝X受體α(LXRα)免疫試劑盒
活潑微球菌同源盒基因HOXA6蛋白抗體Human STK33 ELISA Kit大鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒
翹鱗香菇同源盒基因HOXA7蛋白抗體Human STK32B ELISA Kit大鼠甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒
鏈格孢羥基類(lèi)固(17β)脫氫4/17β-HSD4抗體Human STK32C ELISA Kit大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷IA(MAN1A1)免疫試劑盒
白腐菌血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體Human STEAP3 ELISA Kit大鼠甘膽(CG)免疫試劑盒
粘絲膜菌血紅結(jié)合蛋白1抗體Human STK36 ELISA Kit大鼠甘肽/甘(GAL)免疫試劑盒
霍氏格里蒙特氏菌血紅蛋白α抗體Human STIM1 ELISA Kit大鼠甘免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌結(jié)合球蛋白β抗體Human STIM2 ELISA Kit大鼠干因子受體(SCFR)免疫試劑盒
好食脈孢菌海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human STARD3NL ELISA Kit大鼠干因子/肥大生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒
動(dòng)物雙歧桿菌組蛋白H2AZ抗體Human STEAP4(STEAP family member 4) ELISA Kit大鼠干擾誘導(dǎo)蛋白11(IP-11/CXCL11)免疫試劑盒
巴氏醋桿菌羅旺亞種熱休克因子2結(jié)合蛋白抗體Human STARD5 ELISA Kit大鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒
光帽磷傘HEATR2蛋白抗體Human STIP1 ELISA Kit大鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)免疫試劑盒
芽胞桿菌鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體Human STEAP3 ELISA Kit大鼠鈣網(wǎng)蛋白(CRT)免疫試劑盒
尖鐮孢黃瓜專(zhuān)化型(黃瓜枯萎病菌)麻疹病血凝抗體Human STEAP2 ELISA Kit大鼠鈣腔蛋白(CALU)免疫試劑盒
多布克魯維酵母同源盒蛋白HOXC5抗體Human STIM1 ELISA Kit大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒
: Blackburn資源名稱(chēng): 鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC ,>98.5%(GC)沒(méi)食子兒茶
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC, ≥99.5% (GC)芒柄花苷
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│tetraodonis 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,>99.5%(GC)豆甾
ALDH1抑制劑(Disulfiram)AEG-1 AEG-1抗體戊丁酯 ≥98.0 %
ADFP 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體3-溴叔丁二硅 97%
AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病AEV抗體抗氧劑618 試劑級(jí)
ADAM10/MADM/CD156c 去整合樣金屬蛋白10抗體1,3-丁二烯溶液 20 wt. % in toluene
ADAMTS12 整合樣金屬蛋白與凝血1型-12抗體硅鈣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ADH/AVP 抗利尿激/血管升壓抗體苯靈 99%
Adiponectin Receptor 1 脂聯(lián)受體-1抗體苯靈 98%
Adiponectin receptor 2 脂聯(lián)受體2抗體野百合 分析標(biāo)準(zhǔn)品
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)