公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:FAK和ALK雙重抑制劑(CEP-37440)
英文名稱:CEP-37440
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
CEP-37440是新型FAK和ALK雙重抑制劑,IC50分別為2.3nM和120nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1391712-60-9 純度:99.87% 分子量:580.12 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
松口蘑熒光PE-Cy3標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KCNAB3 Antibody人剛地弓形蟲(T.gondii)
貝葉多孔菌(親和純化) 兔IgMAnti-KCNAB1 Antibody人剛地弓形蟲(T.gondii)
赤芝熒光PE標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KCNC2 Antibody人抗副流感病IgG抗體(anti-PIV IgG )
芽孢桿菌屬熒光Cy5標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KCNC4 Antibody人抗副流感病IgG抗體(anti-PIV IgG )
交鏈孢屬熒光APC標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KCNF1 Antibody人大皰性類天皰瘡抗體(BP)
膠孢鏈霉親和標(biāo)記兔抗人IgGAnti-KCNG2 Antibody人大皰性類天皰瘡抗體(BP)
勒仔樹根瘤菌PE標(biāo)記鏈霉親和Anti-KCNG3 Antibody人腸病(Enterovirus)
根癌土壤桿菌(可訂購)堿性磷標(biāo)記鏈霉親和Anti-KCNH1 Antibody人腸病(Enterovirus)
藤黃微球菌辣根過氧化物標(biāo)記鏈霉親和Anti-KCNH3 Antibody人包蟲抗體IgG
燕麥鐮孢金標(biāo)記鏈霉親和(10nm/15nm)Anti-KCNIP1 Antibody人包蟲抗體IgG
產(chǎn)黃纖維單胞菌辣根過氧化物標(biāo)記親合Anti-KCNH5 Antibody人百日咳(PT)
碳樣小單孢菌辣根過氧化物標(biāo)記兔抗HRPAnti-KCNH7 Antibody人百日咳(PT)
轉(zhuǎn)基因玉米NK603質(zhì)粒分子標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)辣根過氧化物標(biāo)記兔抗人IgAAnti-KCNIP1 Antibody人白色念珠菌(C.albicans)
蘇云金芽孢桿菌辣根過氧化物標(biāo)記的蛋白AAnti-KCNIP3 Antibody人白色念珠菌(C.albicans)
釀酒酵母辣根過氧化物標(biāo)記牛血清白蛋白Anti-KCNJ10 Antibody人流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)
乳乳球菌乳亞種辣根過氧化物標(biāo)記人胰島蛋白Anti-KCNIP3 Antibody人流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)
RAS蛋白樣激活劑1抗體多形魯氏酵母人卵巢上皮細(xì)胞
Ras相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2抗體魯氏酵母人急性髓系白血病細(xì)胞
食道癌抑制生長(zhǎng)蛋白抗體羅斯酵母人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
環(huán)指蛋白139抗體洛格酵母正常人皮膚成纖維細(xì)胞
FAK和ALK雙重抑制劑(CEP-37440)側(cè)茁霉屬 蠟果楊梅酸 B
金針菇 Myricanol triacetate
豬丹絲 楊梅
豬丹絲 Myricadiol
馬杜放線 玉葉金花甙酸甲酯
灰平鏈霉 小葉九里香內(nèi)酯
桔青霉 二乙酸長(zhǎng)葉九里香內(nèi)酯二酯
大腸埃希 九里香亭,九里香,長(zhǎng)葉九里香內(nèi)酯二
李季倫氏類芽孢桿 九里香
果生鏈核盤 桑根皮
法氏檸檬酸桿 Moracin O
豇豆慢生根瘤 Momor-腦苷脂I
層出鐮孢原變種 小蕓木香豆精
白地霉 米內(nèi)苷
多主葡萄殼 甲基赤芝萜酮