c-Met抑制劑（EMD-1214063）公司*的產(chǎn)品：CRMP2/Dpysl2(collapsin response mediator protein-2)/FITC 熒光標(biāo)記抗二氫嘧啶樣2抗體IgG性氧化鋁 200-300目
Phospho-CRMP-2 (Thr514) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化二氫嘧啶樣2抗體IgG性氧化鋁 100-200目
CRP/Biotin

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：c-Met抑制劑（EMD-1214063）

英文名稱：EMD-1214063

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

鏈球菌(不定種)熒光Cy3標(biāo)記豬胰島蛋白Anti-JDP2 Antibody人麻疹病(MV)

多粘類芽孢桿菌(免疫親和純化) 小鼠IgGAnti-JTB Antibody人麻疹病(MV)

橄欖色盾殼霉小鼠IgM (免疫親和純化)Anti-JUNB Antibody人流行性腮腺炎(EP)

飛禽島海草球菌(親和純化) 猴IgMAnti-JUN Antibody人流行性腮腺炎(EP)

大腸埃希氏菌Alexa Fluor 350標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KAT2A Antibody人抗流行性出血熱病抗體IgG (EHF)

石竹伯克霍爾德氏菌Alexa Fluor 555標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KANK2 Antibody人抗流行性出血熱病抗體IgG (EHF)

Cecembia兔抗小鼠IgA抗血清Anti-JUND Antibody人痢疾內(nèi)阿米巴抗原

Paenochrobactrum glacieiAlexa Fluor 647標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KAT2B Antibody人痢疾內(nèi)阿米巴抗原

禾稈鐮孢霉熒光Cy5.5標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KAT2B Antibody人萊姆IgG(Lyme-IgG)

放射型根瘤菌熒光PE標(biāo)記雞卵白蛋白Anti-KAT5 Antibody人萊姆IgG(Lyme-IgG)

釀酒酵母FITC標(biāo)記重組金黃色葡萄球菌蛋白AAnti-KAT7 Antibody人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)

豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS16辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的重組蛋白GAnti-KAT5 Antibody人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)

無(wú)花果假單胞菌金標(biāo)記兔抗熒光 (10nm/15nm)Anti-KAT7 Antibody人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)

細(xì)鏈格孢Alexa Fluor 488標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KAT8 Antibody人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)

類芽孢桿菌熒光PE-Cy5標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-KCNA10 Antibody人脊髓灰質(zhì)炎病IgG(PV-IgG)

蠟狀芽孢桿菌兔IgG(親和層析純化)Anti-KCNA5 Antibody人脊髓灰質(zhì)炎病IgG(PV-IgG)

ras基因相關(guān)蛋白R(shí)ab24抗體擲抱酵母人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞

Ras相關(guān)雌激調(diào)節(jié)生長(zhǎng)抑制蛋白栗酒裂殖酵母人間變性大細(xì)胞

RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體路德類酵母人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞

腫瘤抑制基因LUCA15抗體威爾酵母大鼠膝關(guān)節(jié)退變軟骨細(xì)胞
c-Met抑制劑（EMD-1214063）肺炎克雷伯氏 Oleonuezhenide

阿穆?tīng)査箍藶雏}地桿 3-(2-羥基苯基)-2-烯

枯草芽孢桿 奧多諾甙 H

亞歷山大富鹽 O-Acetylcyclocalopin A

紫色直絲鏈霉 去甲絡(luò)石甙元

豬鏈球 去甲布易林

皮狀假絲酵母 N-Methylflindersine

冠突曲霉 N-反式-阿魏酰低聚糖-3-甲氧基酪

燕麥?zhǔn)乘嵫帑渷喎N 夾竹桃它羅苷

黑腐皮殼 歐奕二烯酮 B

秦氏蜜環(huán) Neoechinulin A

球孢傘霉 柚皮

低平101 三乙酸柚皮酯

銅綠假單胞 Nagilactone C

黑曲霉 Myricetin 3-O-galactoside