以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
人精氨酸酶I/II抑制劑 | Arginase inhibitor 1 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Arginase inhibitor 1是一種有效的人精氨酸酶(arginases I和II)抑制劑,IC50分別為223和509nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1345808-25-4 純度:98.0% 分子量:286.18 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
長根奧德蘑*磷化KB抑制蛋白激γ抗體Human TPSG1(Tryptase gamma) ELISA Kit小尾寒羊瘦(LEP)免疫試劑盒
弗氏鏈霉菌磷化KB抑制蛋白激α/IKK α 抗體Human RNF40 ELISA Kit小尾寒羊阿黑皮原(POMC)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RNF38 ELISA Kit孕馬血清促性腺激(PMSG)免疫試劑盒
擬螺卷毛殼磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RNF41 ELISA Kit有機(jī)磷農(nóng)藥殘留試劑盒
土地桿菌屬磷化KB抑制蛋白激α抗體Human RNF219 ELISA Kit乙型流感HA 免疫試劑盒
科摩羅彎孢磷化KB抑制蛋白激γ抗體Human RNF26 ELISA Kit犀牛皮質(zhì)(CORT)免疫試劑盒
辣椒磷化KB抑制蛋白激β抗體Human RNF25 ELISA Kit田鼠睪(T)免疫試劑盒
費(fèi)氏另類弧菌干擾alpha誘導(dǎo)蛋白6抗體Human RNF34 ELISA KitELISA
黃曲霉白介-17E抗體Human RNF38 ELISA Kit絲裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化胰島受體底物p-IRS-1/2抗體Human RNF151 ELISA Kit雙特異性絲裂原活化蛋白激5(MAP2K5)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌阿萊亞種tRNA異亮連接抗體Human RNF167 ELISA Kit雙酚A(BPA)免疫試劑盒
食砜節(jié)桿菌整合α2抗體Human RNF150 ELISA Kit食蟹猴胰高血糖(GC)免疫試劑盒
熒光假單胞菌干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白3抗體Human RNF168 ELISA Kit食蟹猴C肽(C-Peptide)免疫試劑盒
基利恩帚枝霉干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白5抗體Human RNF17 ELISA Kit石斑魚卵黃蛋白原(VTG)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白2抗體Human RNF112 ELISA Kit生物
金針菇F8909干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白5抗體Human RNF10 ELISA Kit三聚ELISA快速
溶藻弧菌Vibrio│alginolyticus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品羥基紅花黃色A
灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%斷血流皂苷A
成團(tuán)泛菌Pantoea│agglomerans 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)大葉茜草
人精氨酸酶I/II抑制劑廣布擬盤多毛孢 基化錫核心蛋白聚糖Elisa
巴氏醋桿 4-溴苯硫酚核因子κBElisa
根瘤 對二溴苯肌氨酸Elisa
灰黃鏈霉蘇州亞種 (4-三氟甲酰基)乙酸乙酯肌酸Elisa
平菇 5-甲氧基-3-甲基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1Elisa
Salmonella enterica subsp. indica 四甲基醋酸銨激活A(yù)Elisa
大腸埃希 鹽酸法舒地爾低密度脂蛋白Elisa
根瘤 4--3,5-二甲基異惡唑低密度脂蛋白受體Elisa
鰻利斯頓氏 1,3-酮二羧酸二乙酯甲狀腺Elisa
谷糠乳桿 3-甲基戊酸堿性成纖維生長因子Elisa
貝萊斯芽孢桿 他莫西芬堿性磷酸Elisa
淡黃籃狀 2-(2,4-二-5-氟苯甲?;?-3-環(huán)基烯酸甲酯(甲酯化物)結(jié)蛋白Elisa
間型莢胞腔 對甲氧基苯甲結(jié)締組織生長因子Elisa
黃桿 1,二肟結(jié)合珠蛋白Elisa
熒光假單胞 1,4-苯二甲硫金屬硫蛋白Elisa