公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Kif15驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑(Kif15-IN-1)
英文名稱:Kif15-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Kif15-IN-1是Kif15驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑,抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):672926-32-8 純度:99.04% 分子量:430.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏菌FITC標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SFTPD Antibody核糖體蛋白L6(RPL6)
豌豆根瘤菌FITC標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SFTPB Antibody核糖體蛋白L23A(RPL23A)
光帽鱗傘膠體金標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SFTPA1 Antibody核糖體蛋白L13A(RPL13A)
PX459 V2.0FITC標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SFTPA1/2 Antibody(PB0433)核糖激(RBKS)
異常畢赤酵母辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SGCA Antibody核糖核抑制因子(RI)
玫瑰黃鞘單胞菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切3(ERI3)
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SGK1 Antibody核糖核外切2(ERI2)
大腸埃希氏菌PE標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SGK1 Antibody核糖核外切1(ERI1)
野土地桿菌辣根過(guò)氧化物標(biāo)記兔抗人IgAAnti-SHANK3 Antibody核糖核T2(RNASET2)
魯酵母生物標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-SHBG Antibody核糖核P(RNASEP)
棒桿菌屬生物標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHC1 Antibody核糖核L(RNASEL)
Bacillus aryabhattai生物標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SHFM1 Antibody核糖核K(RNASEK)
釀酒酵母生物標(biāo)記的兔抗人分泌型IgAAnti-SHH Antibody核糖核H(RNASEH)
埃及枝頂孢生物標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SHC1 Antibody(PB0435)核糖核A9(RNASE9)
香草蘭根疾Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SHMT1 Antibody核糖核A8(RNASE8)
黃桿菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗人IgGAnti-SHISA7 Antibody核糖核A7(RNASE7)
核纖層蛋白A識(shí)別因子抗體Bacillussubterraneus大鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物
中性鞘磷脂2抗體Helcococcuskunzii大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞提取物
核受體蛋白NR2E1抗體脫葉鏈霉菌大鼠心肌細(xì)胞提取物
N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體梭菌屬大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
Kif15驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑(Kif15-IN-1)蠟狀芽孢桿 前胡 A
多源中間根瘤 聚乙二300
合歡枯萎病 12-羥基異補(bǔ)骨脂酚
華癸中間根瘤 法莫替丁
無(wú)二酸檸檬酸桿 伽升沃E
猴頭 新環(huán)桑色烯
類芽孢桿 吡蟲(chóng)啉
反芻雙歧桿 4'-羥基-5,6-脫氫醉椒
寄生彎孢聚殼 血竭黃烷A
食腺嘌呤芽生葡萄孢酵母 卡波姆940
毛球?qū)?/span> 龍血D
釀酒酵母 山豆根黃烷酮A
金灰青霉 原花青
棲土曲霉 3',5'-二異戊烯基金雀異黃
蠟狀芽孢桿 楮樹(shù)黃酮F