公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HDAC6抑制劑(Tubacin)
英文名稱:Tubacin
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|20mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Tubacin是一種有效的,選擇性的HDAC6抑制劑,IC50值為4nM,大約是對(duì)HDAC1的350倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):537049-40-4 純度:98.87% 分子量:721.86 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Hyphomonas adhaerensRAM-11抗體Anti-CYP1A2 Antibody(PB0574)整合α8(ITGα8)
草本枝孢霉抑癌基因Rbms3抗體Anti-CYP27A1 Antibody整合α7(ITGα7)
單增李斯特氏菌抵抗樣分子α抗體Anti-CYP2A6 Antibody整合α6(ITGα6)
枯草芽孢桿菌質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體Anti-CYP27A1 Antibody整合α5(ITGα5)
枯草芽胞桿菌性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體Anti-CYP27B1 Antibody整合α4(ITGα4)
平菇RAN結(jié)合蛋白3抗體Anti-CYP2D6 Antibody整合α3(ITGα3)
擴(kuò)展青霉環(huán)指蛋白35抗體Anti-CYP2C19 Antibody整合α2(ITGα2)
根瘤菌環(huán)指蛋白70抗體Anti-CYP2E1 Antibody整合α11(ITGα11)
淡紫擬青霉RH血型C糖蛋白抗體Anti-CYP2B6 Antibody整合α10(ITGα10)
黑曲霉磷化雷帕霉靶蛋白復(fù)合體2抗體Anti-CYP2E1 Antibody整合α1(ITGα1)
松口蘑環(huán)指蛋白138抗體Anti-CYP2E1 Antibody真核翻譯延伸因子1γ(EEF1γ)
多根硬皮馬勃(可)Nogo66受體相關(guān)蛋白3抗體Anti-CYP2E1 Antibody(PB0186)真核翻譯起始因子6(EIF6)
成團(tuán)腸桿菌(成團(tuán)泛菌)Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體Anti-CYP2S1 Antibody真核翻譯起始因子4A2(EIF4A2)
拉考夫梅奇酵母Rh血型C抗原抗體Anti-CYP2U1 Antibody著絲粒蛋白I(CENPI)
短穩(wěn)桿菌RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體Anti-CYP3A4 Antibody(PB1111)著絲粒蛋白H(CENPH)
綠木霉Ras樣蛋白A抗體Anti-CYP7A1 Antibody著絲粒蛋白F(CENPF)
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
ATCC51837=DSM7285=HAMBI2068=IFO(nowNBRC)15208=JCM10276=LMG17328=NCPPB2661資源名稱: 玫瑰新鞘菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
蛹蟲草Cordyceps│militaris (L.) Link 質(zhì)量規(guī)格:0.97
HDAC6抑制劑(Tubacin)海氏腸球 4-基-3-四氫噻吩酮生長受體Elisa
角殼多年臥孔 RVS肉湯/A>生長抑Elisa
日本曲霉 MKTTn肉湯(ISO)生長抑受體5Elisa
總狀毛霉 賴氨酸鐵瓊脂(LIA)嗜酸粒趨化因子Elisa
山西黑粉 4-溴-3,5-二羥基瘦Elisa
傘枝犁頭霉 N-(2,4-二基)-L-酸(易)水通道蛋白1Elisa
鼠傷寒沙門氏 支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精氨酸)松弛肽;松弛Elisa
蘇云金芽胞桿尼日利亞亞種 胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)糖化血紅蛋白Elisa
解脂假絲酵母 布氏選擇性培養(yǎng)基糖皮質(zhì)受體αElisa
鞘氨單胞屬 C.L.E.D培養(yǎng)基糖皮質(zhì)誘導(dǎo)的TNF受體Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 C.L.E.D培養(yǎng)基添加劑鐵蛋白Elisa
繡色土生單胞 GC瓊脂透明質(zhì)酸Elisa
牛肝 4-溴苯基乙褪黑Elisa
大腸埃希 BLB瓊脂偽狂犬病病Elisa
芽孢桿 PEA瓊脂瘟病Elisa