詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:NVP-AEW541
產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
NVP-AEW541是一種有效的IGF-1R抑制劑,IC50為0.15μM,也抑制InsR,IC50為0.14μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:475489-16-8 別名:AEW541 純度:98.76% 分子量:439.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大腸埃希菌黑色瘤相關抗原D1抗體Human ODF2L ELISA Kit神經生長因子(NGF)
產黃青霉中胚層誘導早期反應蛋白2抗體Human NWD1 ELISA Kit神經母瘤抗體(NB-Ab)
繩生毛殼菌MDM2樣P53蛋白結合抗體Human NVL ELISA Kit神經膠質纖維性蛋白(GFAP)
瓊氏不動桿菌RNA相關結合蛋白MCG10抗體Human NXN ELISA Kit神經降壓(NT)
Aurantimonas sp.線粒體核糖體蛋白S4抗體Human ODF3 ELISA Kit神經激肽B(NKB)
層臥孔菌緊密連接蛋白MUPP1抗體Human ODZ1 ELISA Kit神經穿透1(NPTX-1)
釀酒酵母肌管相關蛋白14抗體Human NXPH1 ELISA Kit神經保護因子(CVNPF)
乳白蘑菇小腦癥基因1/認知相關蛋白抗體Human NUP93 ELISA Kit神經(NA)
聚多曲霉鋅指蛋白60抗體Human NXT2 ELISA Kit上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)
芽孢桿菌肌球蛋白6抗體Human NUP98-NUP96 ELISA Kit上皮中性?;罨?8(ENA-78)
綠色木霉肌肉抗體Human NUPL2 ELISA Kit上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)
囊狀匐柄霉代謝型谷受體-3抗體Human NUR77 ELISA Kit上皮黏附分子(Ep-CAM)
鮑姆針層孔菌促代謝型谷受體2+3抗體Human NUPL1 ELISA Kit上皮特異性抗原(ESA)
盔形畢赤酵母促代謝型谷受體1+5抗體Human Nurr1/NR4A2 ELISA Kit上皮膜抗原(EMA)
單胞菌屬MHC I類鏈相關蛋白A/組織相容性復合物MHCIa抗體Human NUS1 ELISA Kit傷寒抗原(St-Ag)
農研所芽孢桿菌肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體Human NVL ELISA Kit傷寒抗體(St-Ab)
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規(guī)格:>99.0%(HPLC)西紅花苷I
豬霍亂沙門氏菌Salmonella│cholerae-suis 質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)西紅花苷
刺芹側耳(杏鮑菇)Pleurotus│eryngii 質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)煙酰
IGF-1R抑制劑(NVP-AEW541)Xenorhabdus 乙酰氧肟酸皮質Elisa
黃曲霉 二巰基馬來二鈉皮質酮;腎上腺酮Elisa
草酸青霉 八苯基環(huán)四硅氧烷前列環(huán)Elisa
膠孢 N-(3-溴基)鄰苯二甲酰亞前列腺E2Elisa
釀酒酵母 2,6-吡啶二甲酸二甲酯Elisa
假單胞 1-溴-5-戊烷去甲腎上腺Elisa
流散隱球酵母 2-甲酯全段甲狀旁腺Elisa
擬可可毛球二孢 α-溴肉桂固酮Elisa
杏鮑菇 溴乙酸芐酯狀腺原氨酸Elisa
谷氨酸棒桿 3-甲基-2-甲酸三葉因子3Elisa
四川散斑殼 4,4-二甲氧基-2-丁酮神經肽YElisa
嗜熱脂肪芽孢桿 4-氨基苯二甲酸神經元烯化Elisa
熱帶假絲酵母 2-氨基-5-嘧啶腎Elisa
蠟葉曲霉 代環(huán)己烷腎損傷分子1Elisa
酒色青霉 1,3-酮二羧酸生長分化因子15Elisa