商品介紹:
UM729是一種新型的嘧啶吲哚,對AhR拮抗劑有協(xié)同效應(yīng),能抑制AML細(xì)胞的分化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1448723-60-1 分子量:367.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:AML細(xì)胞分化抑制劑(UM729)
英文名稱:UM729
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
慢生根瘤菌FA20A抗體Human CELA2A (Chymotrypsin-like elastase family member 2A) ELISA KIT牛高密度脂蛋白(HDL)免疫試劑盒
食戴爾福特菌*成纖維生長因子18抗體Human CHEK2 (Serine/threonine-protein kinase Chk2) ELISA KIT牛肝脂(HL)免疫試劑盒
多殺性巴氏桿菌叉頭蛋白O1抗體Human CIB2 (Calcium and integrin-binding family member 2) ELISA KIT牛甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒
褐球固氮菌纖維母生長因子6抗體Human CTRB1 (Chymotrypsinogen B) ELISA KIT牛甘膽(CG)免疫試劑盒
節(jié)桿菌屬免疫球蛋白A Fc段受體1抗體Human CCL26 (C-C motif chemokine 26) ELISA KIT牛甘肽(GAL)免疫試劑盒
滕倉赤霉脂肪延長抗體Human CABLES1 (CDK5 and ABL1 enzyme substrate 1) ELISA KIT牛干擾-tau 免疫試劑盒
大腸埃希菌巖藻糖轉(zhuǎn)移2抗體Human CASS4 (Cas scaffolding protein family member 4) ELISA KIT牛附睪分泌蛋白E1(NPC2)免疫試劑盒
山綠豆根瘤菌雞白痢、雞傷寒抗體Human CLK4 (Dual specificity protein kinase CLK4) ELISA KIT牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒
*正紅菇范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體Human CTCF (Transcriptional repressor CTCF) ELISA KIT牛肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試劑盒
拜耳接合酵母卵泡抑抗體Human CD2BP2 (CD2 antigen cytoplasmic tail-binding protein 2) ELISA KIT牛肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒
釀酒酵母Fas活化的絲/蘇激抗體Human CD300E (CMRF35-like molecule 2) ELISA KIT牛非酯化脂肪(NEFA)免疫試劑盒
傘枝犁頭霉脆性組三聯(lián)體抗體Human CD83(CD83 antigen) ELISA Kit牛端粒(TE)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌*纖維母表面蛋白抗體Human CD99L2 (CD99 antigen-like protein 2) ELISA KIT牛低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒
長柄鏈格孢前列腺E受體4相關(guān)蛋白抗體Human CASS4 (Cas scaffolding protein family member 4) ELISA KIT牛蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒
鮮綠青霉FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端)Human CLK4 (Dual specificity protein kinase CLK4) ELISA KIT牛彈性蛋白2,中性粒(ELA2)免疫試劑盒
香蕉成纖維生長因子受體2抗體Human CABLES1 (CDK5 and ABL1 enzyme substrate 1) ELISA KIT牛彈性蛋白1,胰腺(ELA1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)維生A醋酯
稻麥角菌Claviceps│oryzae-sativae 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99%(GC)脫羊藿
: ATCC49145資源名稱: 陰道加德納氏菌 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GCS,≥99.0%(GC)脫穿心蓮內(nèi)酯琥珀半酯
AML細(xì)胞分化抑制劑(UM729)三叔?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oil red O/Solvent Red 27 抑癌蛋白DKK1抗體包裝5g
三蔗糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sudan red G/Solvent Red 1膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DISPA抗體包裝1g
三葉豆紫檀苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sudan Black B /Solvent Black 3DIRAS2蛋白抗體包裝250mg
桑皮苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sudan Red B/Solvent Red 25DDX58抗體包裝1g
色甘鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sudan Red 7B/Solvent Red 19DDX4抗體包裝25g
沙蟾精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sudan Blue II/Solvent Blue 35鴨瘟病DPV抗體包裝5g
沙丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl red交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體包裝25ml
沙利度(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: m-Methyl red腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5ml
山梨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl Red sodium saltDNA斷裂因子抗體(蛋白激活脫氧核糖核)包裝1g
山梨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cinoxacin脫氧核糖核γ抗體包裝5g
麝香草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Norandrostenedione死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g
腎上腺色腙(卡巴克洛)標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱: Dapagliflozin propanediol hydrate脫氧核糖核1抗體包裝25g
生物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Anacetrapib;MK0859脫氧核糖核2抗體包裝1g
十八烷,1-十八(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dabigatran etexilate死亡防衛(wèi)蛋白1抗體包裝5g
十二烷基硫鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: RivaroxabanDuffy血型趨化因子受體抗體包裝25ml