公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:P-selectin抑制劑(PSI-697)
英文名稱:PSI-697
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PSI-697是一個P-selectin抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:851546-61-7 別名:P-Selectin Inhibitor 純度:98.24% 分子量:367.83 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蠟樣芽胞桿菌PE-Cy3標記的兔抗羊IgMAnti-SEMA3E Antibody黑親和(MLPH)
平菇PE-CY5標記的兔抗羊IgMAnti-SENP1 Antibody黑皮質(zhì)激5受體(MC5R)
藍微褐鏈霉菌辣根過氧化物標記的驢抗羊IgGAnti-SERPINA4 Antibody黑皮質(zhì)激4受體(MC4R)
*杏葉斑鏈格孢辣根過氧化物標記的小鼠抗羊IgGAnti-SERPINA4 Antibody黑皮質(zhì)激3受體(MC3R)
枯草芽孢桿菌羅丹明標記的羊抗大鼠IgGAnti-SERPINA3 Antibody黑瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)
泡盛曲霉Cy7標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINA1 Antibody(PB0371)黑瘤黏附分子(MCAM)
中山氏芽孢乳桿菌中山氏亞種PE標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINA1 Antibody黑瘤缺乏因子2(AIM2)
嬰兒配方乳粉 低聚果糖PE-Cy3標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINA5 Antibody黑瘤缺乏因子1(AIM1)
膠孢Cy5標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINA6 Antibody黑色瘤優(yōu)先表達抗原(PRAME)
釀酒酵母Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINB5 Antibody(PB0311)黑色瘤關(guān)聯(lián)硫軟骨蛋白聚糖(MCSP)
釀酒酵母Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINC1 Antibody黑色瘤關(guān)聯(lián)ME20(ME20M)
枯斑擬盤多毛孢Alexa Fluor 647標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SERPINB2 Antibody(PB0372)黑色聚集激受體1(MCHR1)
木耳屬Cy5標記的驢抗羊IgGAnti-SERPINC1 Antibody黑色A(MLANA)
北京諾卡氏菌Alexa Fluor 350標記的驢抗羊IgGAnti-SERPINE1 Antibody赫曼斯基普德拉克綜合征蛋白6(HPS6)
根瘤菌膠體金標記的羊抗人IgMAnti-SERPINE1 Antibody核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)
兩歧雙歧桿菌PE-Cy3標記的兔抗人分泌型IgAAnti-SERPINH1 Antibody核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)
腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體Methylobacteriumaquaticum大鼠成骨細胞提取物
軸突生長誘向因子G2抗體Methylobacteriumtarhaniae大鼠腎小管上皮細胞提取物
軸突蛋白2抗體Methylobacteriumplatani大鼠膀胱平滑肌細胞提取物
軸突蛋白1Neurexin1α抗體Arthrobacterilicis大鼠腎上皮細胞提取物
P-selectin抑制劑(PSI-697)綠僵 二氫齒孔酸
禿裸鏈霉 堿性氧化鋁
納瓦河部落奇異球 多孔酸C
白僵 聚乙二20000
泡囊側(cè)耳 3-表去氫茯苓酸
絨蓋干酪 去甲白屈菜紅堿
痰塔特姆氏 聚乙二10000
葡糖桿屬 O-乙酰五味子酯L
淡藍褐糖絲 聚乙二8000
米舒青霉 安五酸
草菇 異性南五味子; 異南五味子 C
孟氏假單胞 聚乙二6000
球紅酵母 南五味子木脂N
釀酒酵母 聚乙二4000
釀酒酵母 五脂酮D