商品介紹:
JNJ-42041935是高效的,競(jìng)爭(zhēng)性和選擇性的脯氨酰羥化酶PHD抑制劑,抑制PHD1,PHD2,and PHD3的pKi值分別為7.91±0.04,7.29±0.05和7.65±0.09。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1193383-09-3 純度:99.93% 分子量:346.65 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:脯氨酰羥化酶PHD抑制劑(JNJ-42041935)
英文名稱:JNJ-42041935
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鹽普拉克索英文名稱: Sodium bismuthate過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體包裝500g
鹽普拉克索無英文名稱: Sodium diatrizoate dihydrate過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體包裝100g
鹽普魯英文名稱: Sodium fluoroaluminate朊病蛋白CD230抗體包裝100g
鹽普羅帕英文名稱: Sodium hippurate孕激受體β(MPRβ)抗體包裝500g
鹽普莫英文名稱: Sodium laurate前列腺F2a受體抗體PGF2αR包裝1g
鹽去羥英文名稱: Sodium metaaluminate泛基賴抗體包裝5g
鹽噻加賓英文名稱: Sodium metavanadate dehydrate核糖體p70 S6蛋白激抗體包裝1g
鹽賽庚啶英文名稱: Sodium n-caprylatep53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體包裝5g
鹽賽洛唑啉英文名稱: Sodium oxamateBcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝250g
鹽三拉英文名稱: Sodium phenyl phosphate, dehydrate磷脂爬行3抗體包裝5mg
鹽舍曲林英文名稱: Sodium-2-naphthalenesolfonate骨骼肌線粒體膜蛋白PARL抗體包裝10MG
鹽司來吉蘭英文名稱: Span* 20多核苷磷化蛋白抗體包裝100g
鹽司維拉姆英文名稱: Stains-All胃腸道相關(guān)酪激抗體(蛋白酪激5)包裝25g
鹽坦洛新/鹽坦索羅辛英文名稱: Strontium carbonatePEST含核蛋白抗體包裝5g
鹽溴己新英文名稱: Strontium sulfate磷化p53結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
褐紅小孔菌Microporus│affinis (Blume & T. Nees) Kuntze 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品胱抑B試劑盒磺間二氧嘧啶;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
: 29資源名稱: O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品胱抑A試劑盒鹽環(huán)沙星;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
鼠傷寒沙門氏菌Salmonella│typhimurium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)胱天蛋白激活的脫氧核糖核試劑盒脫氫乙-對(duì)照品;有報(bào)告
脯氨酰羥化酶PHD抑制劑(JNJ-42041935)轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β3抗體(TGFβ3)膽甾烷 CHOLESTAN-3-b-OL, (5a)-(AS)Human, Mouse, Rat
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2抗體(TGF-βRⅡ,TGFβRⅡ)膽甾烷 CHOLESTAN-3-b-OL, (5a)-(AS)Human, Mouse
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體1抗體膽甾烷 CHOLESTAN-3-b-OL, (5a)-(AS)Human, Mouse, Rat
狀腺過氧化物抗體膽甾烷 CHOLESTANE, (5a-)-(P)Human
腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體膽甾烷 CHOLESTANE, (5a-)-(P)Human
生精凋亡相關(guān)因3抗體膽甾烷 CHOLESTANE, 5-ALPHA-(RG)Human
三狀腺T3抗體膽甾烷 CHOLESTANE, 5-ALPHA-(RG)Human, Mouse
按蚊硫酯包含蛋白-1抗體膽甾烷 CHOLESTANE, 5-ALPHA-(RG)Human, Mouse, Rat
端粒結(jié)合蛋白P23抗體喹那多/5,7-二-8-羥喹哪啶 CHLORQUINALDOL(RG)Human, Mouse