以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JAK3抑制劑(Tofacitinib) | Tofacitinib | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
Tofacitinib是一種有效的JAK3抑制劑,IC50值為1nM;同時(shí)能夠抑制JAK2,JAK1,Rock-II和Lck的活性,IC50分別為20,112,3400和3870nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):477600-75-2 別名:Tasocitinib;CP-690550 純度:99.62% 分子量:312.37 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
產(chǎn)氣腸桿菌雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸源性生長(zhǎng)因子)抗體Human miRNA-210 ELISA Kit豬成纖維生長(zhǎng)因子19(FGF19)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型磷化水通道蛋白2抗體Human anti-2019 nCoV(S) IgM ELISA Kit豬腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
大腸埃希菌粘附相關(guān)激抗體Human ALOX5(Arachidonate Lipoxygenase 5) ELISA Kit豬腸三葉因子(ITF)免疫試劑盒
中國(guó)臺(tái)灣根霉磷化粘附相關(guān)激抗體Human anti-2019 nCoV(S) IgG ELISA Kit豬補(bǔ)體因子H(CFH)免疫試劑盒
諾爾斯氏鏈霉菌磷化蛋白激B抗體Human Fcγ(Fc Fragment of IgG) ELISA Kit豬補(bǔ)體片斷5b(C5b)免疫試劑盒
淡紫擬青霉磷化水通道蛋白2抗體Human anti-SARS-CoV2(N) IgG ELISA Kit豬補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
白僵菌磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體Human anti-SARS-CoV2(N) IgM ELISA Kit豬補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
亞絨蓋牛肝菌磷化蛋白激B抗體Human OTUD5(OTU domain containing 5) ELISA Kit豬補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
鞘鞍桿菌磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體Human Hsd17b13( 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase 13) ELISA Kit豬表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒
戊糖片球菌磷化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體Human SEPTIN7(septin-7) ELISA Kit豬表達(dá)于SiSo系的受體結(jié)合型腫瘤抗原(EBAG9)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌磷化雄激受體抗體Human MARK2 ELISA Kit豬白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒
鉤狀木霉磷化雄激受體抗體Human MARK1 ELISA Kit豬白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌磷化蛋白激AKT1,2,3抗體Human MARK4 ELISA Kit豬白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
淡紅擬無(wú)枝菌磷化蛋白激B抗體Human MARK3 ELISA Kit豬白介6(IL-6)免疫試劑盒
鏈格孢磷化活化復(fù)制因子2抗體Human MARVELD2 ELISA Kit豬白介4(IL-4)免疫試劑盒
更新世肉桿菌凋亡相關(guān)蛋白3抗體Human MARS ELISA Kit豬白介3(IL-3)免疫試劑盒
纖維堆囊菌Sorangium│cellulosum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR型肝炎IgM試劑盒異古倫賓
冢村氏菌Tsukamurella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mg,BC型肝炎IgG試劑盒吲哚
金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR酰羧化β多肽試劑盒原七葉皂苷元
JAK3抑制劑(Tofacitinib)蠟梅堿英文名稱(chēng): 6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3A/3B抗體包裝5g
辣椒堿,辣椒(天然提取)英文名稱(chēng): Adenine phosphate 黃體釋放/促性腺釋放抗體包裝100g
辣椒堿,辣椒(天然提取標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): HypoxanthineLRRC23蛋白抗體包裝25g
辣蓼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Guanine LRRC39蛋白抗體包裝1g
萊苞迪甙A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Guanine 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體包裝5g
萊苞迪甙C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Water-soluble tetrazoliuM -8;GLT008L3MBTL3蛋白抗體包裝1g
萊苞迪甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): GLT005富含亮重復(fù)蛋白25抗體包裝5g
萊苞迪苷G英文名稱(chēng): GLT004白介31受體a抗體包裝1g
萊菔子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Asiatic acidLRSAM1蛋白抗體包裝250mg
蘭雪醌,白花丹醌,白花丹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Asiatic acidLIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝50MG
藍(lán)布正(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Forskolin乳菌菌體表面蛋白抗體包裝1g
欖香英文名稱(chēng): Palmatine透明質(zhì)受體抗體包裝5g
狼(狼大戟)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cinacalcet HCl,AMG073白三烯A4解抗體包裝5MG
狼(月腺大戟)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Palmatine肝臟X受體抗體包裝25g
狼乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pronase E溶體蛋白跨膜β4抗體包裝5g