產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Syk tyrosine kinase抑制劑
英文名稱:BAY 61-3606 dihydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
BAY61-3606dihydrochloride是一種有效的,選擇性的,可逆的,ATP競爭性的Syk tyrosine kinase抑制劑,IC50值為10nM;對Btk,F(xiàn)yn,Itk,Lyn和Src無抑制作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:648903-57-5 別名:BAY 61-3606 純度:98.74% 分子量:463.32 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
金龜子綠僵菌磷化β抑制蛋白1抗體Human KRT81 ELISA Kit豬低分子肝(LMWH)免疫試劑盒
牛型放線菌磷化有絲分裂激A抗體Human Langerin ELISA Kit豬彈性蛋白(ELN)免疫試劑盒
假桄榔葉點霉磷化APS抗體Human KRT6B ELISA Kit豬膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
厚壁芽孢桿菌有絲分裂激A抗體Human KRT80 ELISA Kit豬單核增多性李斯特菌O((LLO)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種干擾誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體Human KC1 ELISA Kit豬單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
哈茨木霉水通道蛋白-2抗體Human KTN1 ELISA Kit豬催乳(PRL)免疫試劑盒
釀酒酵母腫瘤抑制基因ABI2/精酪蛋白激結(jié)合蛋白抗體Human LAMR1/RPSA ELISA Kit豬催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌ADP核糖基化因子樣11抗體Human LANCL1 ELISA Kit豬促性腺激抑制激(GnIH)免疫試劑盒
斑玉蕈ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體Human KRT6B ELISA Kit豬促生長激釋放激(GHRH)免疫試劑盒
地霉半乳糖酵母ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體Human Langerin ELISA Kit豬促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
粘著劍菌ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體Human KRT80 ELISA Kit豬促卵泡(FSH)免疫試劑盒
Acinetobacter genospecies自噬相關(guān)蛋白10抗體Human KRT81 ELISA Kit豬促甲狀腺釋放激(TRH)免疫試劑盒
膠孢?;Y(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體Human KPNA6(Karyopherin subunit alpha-6) ELISA Kit豬促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
紅球菌基酰化1抗體Human KPTN ELISA Kit豬雌激(E)免疫試劑盒
松針散斑殼脂肪甘油三酯脂抗體Human KPNA4(Karyopherin subunit alpha-4) ELISA Kit豬雌二受體(ER)免疫試劑盒
抗微生物野野村氏菌磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體Human KPNA5 ELISA Kit豬雌二(E2)免疫試劑盒
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR并殖吸蟲抗體試劑盒油酯
簡青霉Penicillium│simplicissimum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR并殖吸蟲抗體試劑盒硬脂酯
嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌Stenotrophomonas│maltophilia 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR型肝炎病試劑盒乙酰蒲公英萜
Syk tyrosine kinase抑制劑苦楝皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: isomogroside VLHX5蛋白抗體包裝25g
苦木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sinomenine HCl單絲蛋白激1+2抗體包裝100g
苦蘇花皂苷C英文名稱: SinomenineLIN7C蛋白抗體包裝25g
苦杏仁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DNA.Na富含亮重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體包裝500g
苦玄參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: RNA富含亮α2糖蛋白抗體包裝1g
苦玄參苷IA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Uridine-5-diphosphoglucose disodium salt 腦特異性磷脂磷樣蛋白1抗體包裝5g
苦玄參苷IB英文名稱: GMP跨膜蛋白TMEM176B抗體包裝1g
苦玄參苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AMP 富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白2抗體包裝1g
苦玄參苷X(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adenosine-5-monophosphoric acid 富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白4抗體包裝5g
寬筋藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-Bromouracil LZIC蛋白抗體包裝25g
寬葉纈草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Uracil Lgi3蛋白抗體包裝5g
款冬花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytosine Lhx4蛋白抗體包裝25g
款冬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytosine 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SCDO3抗體包裝5g
葵花盤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adenine sulfate RNA聚合相關(guān)蛋白LEO1抗體包裝100g
昆明山海棠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adenine sulfate 性脈絡(luò)叢腦膜炎病蛋白抗體包裝25g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)