以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
NOD-IN-1是一種有效的核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域(NOD)樣受體NOD1和NOD2的抑制劑,IC50值分別為5.74μM和6.45μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):132819-92-2 純度:98.99% 分子量:343.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
短裙竹蓀3-3ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體Human HSD17B2 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒
紡錘形擬酵母精加壓受體2抗體Human HSD17B4 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)免疫試劑盒
蒂莫內(nèi)馬賽菌凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ASC抗體Human HSD17B6 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒
蘋果鏈格孢絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human HIST2H2AA4 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒
長(zhǎng)雙歧桿菌抗凝血3抗體Human HMCN1 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒
發(fā)酵假絲酵母人血清白蛋白單克抗體Human Histone-H3 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)免疫試劑盒
牡丹葡萄孢載脂蛋白A4抗體Human HIST3H2A ELISA Kit小鼠骨保護(hù)(OPG)免疫試劑盒
黃色桿菌磷化Rho鳥苷交換因子2抗體Human HIGD1A ELISA Kit小鼠谷胱甘肽過氧化(GSH-Px)免疫試劑盒
百脈根中間根瘤菌磷化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human HIGD1B ELISA Kit小鼠谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒
天藍(lán)色鏈霉菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體Human HIVEP1 ELISA Kit小鼠谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒
支氣管敗血波氏菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體Human Hikeshi ELISA Kit小鼠谷脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒
糞產(chǎn)堿菌糞亞種共濟(jì)失調(diào)7樣蛋白3B抗體Human HERC4 ELISA Kit小鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒
平菇(科大雜優(yōu))感染性蛋白蛋白1抗體Human HEPACAM ELISA Kit小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族5抗體Human HIGD1B ELISA Kit小鼠睪(T)免疫試劑盒
污泥根瘤菌植物生長(zhǎng)激ABP1抗體Human HEPACAM ELISA Kit小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌磷化活化復(fù)制因子2抗體Human Hikeshi ELISA Kit小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCκB抑制蛋白激試劑盒山椒子烯
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCγ谷酰轉(zhuǎn)移試劑盒1,3,5,8-四羥基山
肉灰色鏈霉菌Streptomyces│griseocarneus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCγ-谷酰環(huán)化轉(zhuǎn)移試劑盒四氫姜黃
NOD1和NOD2抑制劑(NOD-IN-1)石椒草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ecdysterone金屬硫蛋白抗體包裝1g
石榴皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dehydroandrographolide磷化微管相關(guān)蛋白2抗體包裝250mg
石榴皮鞣;安石榴林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dehydroandrographolide succinate內(nèi)皮MMRN1蛋白抗體包裝1g
石榴子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Anhydroicaritin磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體包裝5g
石杉?jí)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Deoxynojirimycin磷化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體包裝25g
矢車菊-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 10-Deacetylbaccatin III磷化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體包裝5g
使君子(使君子仁)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 10-Deacetylbaccatin III磷化髓樣白血病-1抗體包裝25g
首烏藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: vitamin B1磷化雙微體2癌基因抗體包裝5g
熟地黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vitamin B1磷化肌增強(qiáng)因子2抗體包裝1g
鼠尾草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: vitamin B12磷化肌增強(qiáng)因子2抗體包裝1g
鼠尾草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: vitamin B2磷化絲裂原活化蛋白激激1抗體包裝250mg
薯莨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: vitamin B2磷化微管相關(guān)蛋白2抗體包裝1g
薯蕷皂苷;重樓皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: vitamin D2絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體包裝25g
薯蕷皂;薯蕷皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulfisoxazole磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體包裝5g
雙氫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carboxyatractyloside磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體包裝1g