CRAC channels抑制劑(YM-58483)公司*的產(chǎn)品：Anti-Integrin a7/FITC 熒光素標(biāo)記整合素α7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-S100A13/FITC 熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANKR

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：CRAC channels抑制劑(YM-58483)

英文名稱：YM-58483

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大腸埃希氏菌自噬相關(guān)蛋白7抗體Human HLA-DQB2(HLA class II histocompatibility antigen, DQ beta 2 chain) ELISA Kit小鼠胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒

巨大芽孢桿菌炭疽受體2抗體Human HLA-F ELISA Kit小鼠胱天蛋白7(Casp-7)免疫試劑盒

韓芝自噬相關(guān)蛋白4C抗體Human HIP14/ZDHHC17 ELISA Kit小鼠胱天蛋白5(CASP-5)免疫試劑盒

植物乳桿菌自噬蛋白5/凋亡的特異性蛋白抗體Human HIRIP3 ELISA Kit小鼠胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒

淡紫擬青霉芳基硫酯A抗體Human hIST1 ELISA Kit小鼠胱天蛋白10(CASP-10)免疫試劑盒

麥芽糖假絲酵母擬南芥ACA11抗體Human HLTF ELISA Kit小鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒

莖點(diǎn)霉屬AHA3抗體（擬南芥）Human HLX ELISA Kit小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒

香菇磷化鈉ATP蛋白a1抗體Human HIST1H1T ELISA Kit小鼠骨形成蛋白(BMPs)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌殺蟲亞種磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體Human HMBOX1 ELISA Kit小鼠骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒

釀酒酵母中性膽固酯水解1抗體Human HIST1H2AC ELISA Kit小鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)免疫試劑盒

豌豆根瘤菌人星形膠質(zhì)抗體Human HS3ST1 ELISA Kit小鼠骨特性堿性磷C端肽免疫試劑盒

假黃色單胞菌縮A抗體Human HS1BP3 ELISA Kit小鼠骨特性堿性磷(BALP)免疫試劑盒

毛木耳膜粘連蛋白6抗體Human HS2ST1 ELISA Kit小鼠骨橋(OPN)免疫試劑盒

堆形艾美耳球蟲β淀粉樣肽（25-35）抗體Human HSBP1 ELISA Kit小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)免疫試劑盒

乳片球菌血管緊張I抗體Human HSD11B2 ELISA Kit小鼠骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒

分枝節(jié)桿菌腎上腺髓質(zhì)抗體(N端20肽)Human HSCB ELISA Kit小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒

青霉Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BC Grade癌抗原27-29試劑盒石蒜堿

球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,植物激級(jí)癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA Kit山豆根色滿二氫黃Ⅰ

青銅小單孢菌Micromonospora│chalcea 質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級(jí)阿立新A試劑盒山椒子烯
CRAC channels抑制劑(YM-58483)升麻（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (R)-(+)-Corypalmine髓磷酯髓鞘蛋白1抗體包裝5g

升麻苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-Pinitol巨噬克激因子抗體包裝1g

升麻-3-O-α-L-拉伯糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Echinacoside膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體包裝250mg

生脈提取物（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Usnic acid肌球蛋白輕鏈激抗體包裝1g

勝紅薊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Jujuboside A單紡錘體蛋白激1抗體包裝25g

圣草次苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Jujuboside B有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體包裝5g

圣草酚(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Amentoflavone單氧化B抗體包裝100g

蓍草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Hupehenine微小染色體維持缺陷蛋白4抗體包裝25g

十七碳酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Specnuezhenide自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體包裝500g

石菖蒲（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gastrodin髓鞘基因調(diào)控因子抗體包裝5ml

石吊蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gastrodin肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體包裝1g

石吊蘭英文名稱： Stevioside磷化絲裂原活化蛋白激磷1抗體包裝25g

石斛酚（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tubeimoside I促代謝型谷受體2抗體包裝5g

石斛堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pseudolaric Acid B代謝型谷受體-3抗體包裝1g

石見穿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Alantolactone巨噬炎癥蛋白2（ GRＯβ）抗體包裝5g 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)