公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:tubulin抑制劑(微管干擾劑)
英文名稱:Colchicine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:Colchicine 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|200mg|500mg Colchicine是一種tubulin抑制劑及微管microtubule干擾劑。Colchicine誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):64-86-8 純度:99.56% 分子量:399.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
粗糙脈孢菌效應(yīng)蛋白受體1抗體Human MBLAC2 (Metallo-beta-lactamase domain-containing protein 2) ELISA KIT人CD5分子(CD5)免疫試劑盒
朱黃籃狀菌早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1抗體Human MTCH1 (Mitochondrial carrier homolog 1) ELISA KIT人CD4分子(CD4)免疫試劑盒
Paenibacillus durus胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體Human MAVS (Mitochondrial antiviral-signaling protein) ELISA KIT人CD45分子(CD45)免疫試劑盒
解脂假絲酵母真核翻譯起始因子4E抗體Human MBOAT1 (Lysophospholipid acyltransferase 1) ELISA KIT人CD44分子(CD44)免疫試劑盒
加德納菌核輸出蛋白5抗體Human MTHFSD (Methenyltetrahydrofolate synthase domain-containing protein) ELISA KIT人CD44變體6(CD44-v6)免疫試劑盒
長(zhǎng)蠕孢腸致病性大腸桿菌抗體Human MFRP (Membrane frizzled-related protein) ELISA KIT人CD3分子(CD3)免疫試劑盒
褐囊蜜環(huán)菌E4F轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human MMGT1 (Membrane magnesium transporter 1) ELISA KIT人CD34分子(CD34)免疫試劑盒
野土地桿菌睪調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體Human MECOM (MDS1 and EVI1 complex locus protein EVI1) ELISA KIT人CD30分子(CD30)免疫試劑盒
釀酒酵母聚合延伸因子2抗體Human MS4A1(B-lymphocyte antigen CD20) ELISA Kit人CD22分子(CD22)免疫試劑盒
不產(chǎn)色鏈霉菌不產(chǎn)色亞種聚合延伸因子抗體Human MPST (3-mercaptopyruvate sulfurtransferase) ELISA KIT人CD209分子(CD209)免疫試劑盒
釀酒酵母神經(jīng)生長(zhǎng)因子調(diào)控抑制蛋白抗體Human ADAM17(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17) ELISA Kit人CD19分子(CD19)免疫試劑盒
噬果膠黃桿菌內(nèi)皮分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體Human MREG (Melanoregulin) ELISA KIT人CD15分子(CD15)免疫試劑盒
地衣芽孢桿菌紅分化相關(guān)因子1抗體Human MADD (MAP kinase-activating death domain protein) ELISA KIT人CD147分子(CD147)免疫試劑盒
康寧木霉微管相關(guān)蛋白樣蛋白3抗體Human MAS1 (Proto-oncogene Mas) ELISA KIT人CD146分子(CD146)免疫試劑盒
相思根瘤菌內(nèi)皮抑/內(nèi)皮他丁抗體Human MAMLD1 (Mastermind-like domain-containing protein 1) ELISA KIT人CD134分子(CD134)免疫試劑盒
膨端青霉雌激受體β抗體Human MMP15(Matrix metalloproteinase-15) ELISA Kit人CD117分子(CD117)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品硫長(zhǎng)春堿
肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品降二氫辣椒堿
極地考克氏菌Kocuria│polaris 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%馬兜鈴內(nèi)酰A
tubulin抑制劑(微管干擾劑)秦氏蜜環(huán) 位十二內(nèi)酯血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子AElisa
Sphingopyxis baekryungensis 1,7-菲羅啉載脂蛋白AElisa
赭曲霉 特布他林半硫酸鹽載脂蛋白B100Elisa
巴氏醋桿(現(xiàn)1) 雙聯(lián)(2-甲基-2,4-戊二)酸酯增殖核抗原抗體Elisa
Acinetobacter chengduensis 4-溴咪唑腫瘤壞死因子αElisa
植物乳桿 4-噁唑羧酸乙酯3β羥基類固脫氫Elisa
圍小叢殼 4-噁唑甲酸P450膽固側(cè)鏈裂解Elisa
米根霉 1-氨基-4-溴萘α干擾Elisa
聚生殼 4-異喹啉甲α肌動(dòng)蛋白Elisa
黑木耳(黑耳9號(hào)) 2,4-噻唑烷二酮γ干擾Elisa
寒冷桿 5--2-甲氧基苯磺酰白蛋白Elisa
硬水黃桿 1-乙基化吡啶鎓白介12Elisa
高溫黃灰鏈霉 2-溴-5-甲氧基白介2Elisa
淡紫灰鏈霉 2-溴-4-吡啶白介4Elisa
玉米黑粉 3-噻吩甲酸甲酯白介6Elisa