半胱氨酸蛋白酶抑制劑（E-64）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Kiss-1/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)移抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Skp2/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh alpha-Synuclein(NT) 核突觸

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
鐵筷子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Crocin II雷帕霉靶蛋白抗體包裝5g

鐵皮石斛（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tenuifolin粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體包裝100mg

鐵掃帚（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Agrimol B粘蛋白4抗體包裝500mg

鐵莧菜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sanguinarinev-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體包裝1g

葶藶子(播娘蒿)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vanillic acid基質(zhì)金屬蛋白-10抗體包裝250mg

葶藶子（獨(dú)行菜）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vanillic acid突變型P53抗體包裝5g

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Typhaneoside蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體包裝1g

苷G（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside基質(zhì)金屬蛋白-24抗體包裝250mg

苷H（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sclareol巨噬甘露糖受體抗體包裝25g

苷I（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Berberine胃粘液抗體包裝5g

麝香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Neobavaisoflavone基質(zhì)金屬蛋白20抗體包裝1g

頭花蓼（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Neohesperidin尿調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝100g

透骨香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Neoandrographolide肌增強(qiáng)因子2抗體包裝25g

土貝母苷英文名稱： Neomangiferin肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝1g

土貝母苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Arbutin神經(jīng)母特異性轉(zhuǎn)移因子抗體包裝5g

亮白曲霉Aspergillus│candidus 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR軍團(tuán)菌抗體IgM試劑盒橙花;Nerol

平菇Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品軍團(tuán)菌抗體IgG試劑盒長梗秦艽;Waltonitone

匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%軍團(tuán)菌抗體IgA試劑盒長春瑞濱;Vinorelbine
半胱氨酸蛋白酶抑制劑（E-64）中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體酰戈米辛O Pikamilone

內(nèi)臟器官發(fā)育轉(zhuǎn)位相關(guān)蛋白NPH2抗體酰芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium diacetate

胰島受體β抗體酰烏頭原（標(biāo)準(zhǔn)品） Glycyl-L-glutamine monohydrate

內(nèi)皮凝集HL1抗體酰新烏頭原（標(biāo)準(zhǔn)品） Regorafenib(BAY 73-4506)

干擾α抗體酰氧化芍藥苷 Ostarine,GTx-024

白介-17F抗體比枯枯靈,右旋荷包牡丹（標(biāo)準(zhǔn)品） XTT sodium salt

白介6抗體(N端)蓽茇（標(biāo)準(zhǔn)品） (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone

白介6抗體蓽澄茄（標(biāo)準(zhǔn)品） (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone

干擾epsilon 1蛋白抗體蓖麻子（標(biāo)準(zhǔn)品） Macitentan