WNT抑制劑(Pyrvinium pamoate)公司*的產(chǎn)品：Trx(Mouse thioredoxin) ELISA Kit 小鼠硫氧化還原蛋白銅 一水合物 ACS，98.0-102.0%
Collagenase II(Mouse Collagenase Type II) ELISA Kit 小鼠膠原II氫氧化銅 CP,94%
Collagenase I(Mouse Collage

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：WNT抑制劑(Pyrvinium pamoate)

英文名稱：Pyrvinium pamoate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大腸埃希氏菌*Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCRIB Antibody環(huán)氧化合物水解3(EPHX3)

釀酒酵母Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCRIB Antibody環(huán)腺苷二磷核糖水解(cADPRH)

馬克斯克魯維酵母Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCRIB Antibody環(huán)前列腺受體(PTGIR)

熱吸水鏈霉菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC1 Antibody環(huán)加氧2(PTGS2)

節(jié)桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCTR Antibody環(huán)加氧1(PTGS1)

嘴突凸臍蠕孢PE-CY5標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC1 Antibody環(huán)胍肽(CCP)

冷湖黃桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC3 Antibody踝蛋白2(TLN2)

熱帶假絲酵母Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC4 Antibody(PB0464)踝蛋白(TLN)

產(chǎn)黃青霉PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDCBP Antibody滑行蛋白γ(TXLNγ)

地衣芽孢桿菌PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGAnti-SDHA Antibody滑行蛋白β(TXLNβ)

銅抗性鞘菌Cy3標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SDHA Antibody滑行蛋白α(TXLNα)

籃狀菌屬辣根過氧化物標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SDHA Antibody花生四烯脂加氧3(ALOXE3)

大豆慢生根瘤菌PE標(biāo)記的兔抗羊IgGAnti-SDHA Antibody花生四烯-5-脂加氧(ALOX5)

葡萄座腔菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗羊IgGAnti-SDHB Antibody花生四烯-15-脂加氧B(ALOX15B)

Brenneria nigrifluensPE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗羊IgGAnti-SDHB Antibody花生四烯-15-脂加氧(ALOX15)

黃曲霉Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗羊IgGAnti-SDHC Antibody花生四烯-12-脂加氧(ALOX12)

神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白抗體香菇（斜面）大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物

神經(jīng)元Y連鎖蛋白抗體兒童自閉癥相關(guān)蛋白灰黃青霉大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物

神經(jīng)連接蛋白2抗體嗜根考克氏菌（藤黃八疊球菌）大鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞提取物

NIPA樣蛋白3抗體普通變形桿菌大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物
WNT抑制劑(Pyrvinium pamoate)深藍(lán)紫色桿 皮脂酸

孟氏假單胞 新原莪述烯

豬丹絲 橙皮苷

Myxococcus fulvus 桑根酮 L

干小皮傘 對(duì)羥基苯酸

紫色鏈霉琥珀色變種 高良姜 3-O-甲

黑曲霉 楮樹黃酮B

軟化類芽孢桿 鈀碳

枯草芽孢桿 桑呋喃A

柑橘炭疽盤孢 田薊苷

枯草芽孢桿 嵌段式聚F-127

解淀粉芽胞桿 代筋骨草

固氮野野村氏 δ3,2-羥基補(bǔ)骨脂酚

灰黃青霉 聚乙二5000單甲

大腸埃希 山苦草A