PI3K/mTOR抑制劑(PQR309)公司正在出售的產(chǎn)品：Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 小鼠α1微球蛋白三鈣 98%，β-phase basis
MCP-4/CCL13(Mouse monocyte chemotactic protein 4) ELISA Kit 小鼠單核趨化蛋白4化鎘 CP,99.0%
PPAR- Alph

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
粉紅擲孢酵母生物標記的驢抗羊IgGAnti-SATB1 Antibody肌單磷1(IMPA1)

慢生根瘤菌生物標記的羊抗小鼠IgGAnti-SATB1 Antibody肌脫氫(SARDH)

總狀橫梗霉PE-CY5標記的兔抗豚鼠IgMAnti-SCEL Antibody饑餓-O-乙?；D(zhuǎn)移(GOAT)

人蒼白桿菌PE標記的羊抗大鼠IgGAnti-SBCAD/ACADSB Antibody饑餓/肥胖抑制前激原(GHRL)

芽孢桿菌PE-Cy7標記的羊抗大鼠IgGAnti-SATB1 Antibody饑餓(GHRL)

蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種辣根過氧化物標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SCARB1 Antibody(PB0531)活性依賴性神經(jīng)保護因子(ADNP)

乳微桿菌Alexa Fluor 555標記的羊抗兔IgGAnti-SCG3 Antibody活性氧物種調(diào)節(jié)因子1(ROMO1)

黃河張比齊奧氏菌Alexa Fluor 647標記的羊抗兔IgGAnti-SCGB1A1 Antibody活化T-核因子2(NFATC2)

生活飲用水  氟生物標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SCGB1A1 Antibody回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)

黑曲霉Cy5標記的羊抗兔IgGAnti-SCN11A Antibody恢復(fù)蛋白(RCVRN)

釀酒酵母PE-Cy3標記的羊抗兔IgGAnti-SCN1A Antibody黃體激(LH)

半園田頭菇APC標記的羊抗兔IgGAnti-SCLY Antibody脫氫(XDH)

雞傷寒沙門氏菌PE標記的羊抗兔IgGAnti-SCN1B Antibody緩激肽(BK)

嗜熱脂肪地芽孢桿菌Cy3標記的羊抗兔IgGAnti-SCN1B Antibody環(huán)指蛋白39(RNF39)

短桿狀馬賽菌Cy5.5標記的羊抗兔IgGAnti-SCN4B Antibody環(huán)指CCCH-型鋅指蛋白域蛋白1(RC3H1)

白馬勃Alexa Fluor 350標記的羊抗兔IgGAnti-SCNN1A Antibody環(huán)氧化合物水解4(EPHX4)

神經(jīng)細胞粘附分子2抗體土耳其凸臍孢菌大鼠肺成纖維細胞提取物

軸突蛋白1β/Neurexin1β抗體酵米面假單胞菌(酵米面黃桿菌)大鼠支氣管成纖維細胞提取物

NIPAL2蛋白抗體木耳（斜面）大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞提取物

神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體灰樹花（斜面）大鼠氣管和支氣管上皮細胞提取物
PI3K/mTOR抑制劑(PQR309)釀酒酵母 狼色酮

蜂房芽胞桿 四基化銨

嗜熱脂肪地球芽胞桿 人參皂苷Rs3

枯草芽孢桿 金堿

海洋嗜殺酵母 菊粉

黃桿 去甲血根堿

枯草芽孢桿 異櫻花苷

栗疫 2,5-二羥基苯甲

變棕溶桿 3,4'-O-二甲基鞣花酸

邊緣假單胞邊緣致病變種 ?？略碥赵?/span>

羊毛狀青霉 1-萘磷酸鈉鹽一水

微小桿 4,4'-O-二甲基鞣花酸

冰川薄層屬 對二甲氨基苯甲

 1,8-十七碳二烯-4,6-二炔-3,10-二

大腸埃希 人參環(huán)氧炔