PI3Kα抑制劑(BYL-719)公司正在出售的產(chǎn)品：VSIG4 /FITC 熒光標(biāo)記T淋巴負(fù)調(diào)節(jié)蛋白之一抗體IgG生長激釋放肽 95%
VSV-G tag/FITC 熒光標(biāo)記VSV-G tag標(biāo)簽抗體IgGBoc-L-谷氨-1-叔丁酯 98%
VSV-G tag/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記VSV-G tag標(biāo)簽抗體IgGN-芴氧羰-L-谷氨 1-烯酯 99%
VTG/FITC 熒光標(biāo)記卵

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

淺灰綠色鏈霉菌磷化α-連環(huán)蛋白抗體Human GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit人葡萄糖6磷異構(gòu)(GPI)免疫試劑盒

白肉迷孔菌周期E2抗體Human GAD-Ab(Anti-Glutamic Acid Decarboxylase antibody) ELISA Kit人葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒

印度毛殼磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激CAMK2B/D/G抗體Human GAL12(Galectin 12) ELISA Kit人葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯(G-6-Pase)免疫試劑盒

煙管菌腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL8(Galectin 8) ELISA Kit人破傷風(fēng)(Tetanus)抗體(IgG)免疫試劑盒

蘋果鏈格孢（蘋果斑點(diǎn)落葉病菌）磷化腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL14(Galectin 14) ELISA Kit人蘋果脫氫1(MDH1)免疫試劑盒

貴州綠僵菌磷化CREB-1抗體Human GATA4(GATA Binding Protein 4) ELISA Kit人平滑肌肌動(dòng)蛋白(SMA)免疫試劑盒

土曲霉磷化CREB-1抗體Human GARS(Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit人嘌呤核苷磷化(PNP)免疫試劑盒

溜曲霉磷化周期依賴性激6抗體Human GCLM(Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit人脾臟酪激(Syk)免疫試劑盒

尖枝革菌原癌基因CBL2抗體Human GCSFR(Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit人皮質(zhì)抑/皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒

短鏈諾卡氏菌磷化原癌基因CBL2抗體Human GDF3(Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit人皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒

赤曲霉β鏈接相互作用蛋白1抗體Human fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit人皮質(zhì)-3(Cortxin-3)免疫試劑盒

臭紅菇磷化β鏈接相互作用蛋白1抗體Human GDF6(Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit人皮質(zhì)類固結(jié)合球蛋白(CBG)免疫試劑盒

Pseudomonas fluorescens PfO-1磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human GDH/GLDH(Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit人皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

成團(tuán)泛菌葉綠體蛋白抗體（植物）Human GDF7(Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit人皮膚淋巴相關(guān)抗原(CLA)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體Human fT4(Free Thyroxine) ELISA Kit人皮膚蛋白(DPT)免疫試劑盒

放射形根瘤菌磷化絲切蛋白抗體Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人皮動(dòng)蛋白(CTTN)免疫試劑盒

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BSB淋巴抗原試劑盒次大風(fēng)子

鴨疫里氏桿菌Riemerella│anatipestifer 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRblca-4 次

: IOCM30資源名稱: 豇豆慢生根瘤菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRblca-1 催吐蘿芙木定
PI3Kα抑制劑(BYL-719)谷氨酸棒桿 6-羥基煙酸轉(zhuǎn)化生長因子Elisa

四川散斑殼 3-甲酸乙酯IV型膠原Elisa

遼寧盤孢 氫化可的槍乙酸因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1Elisa

大腸埃希氏 吡啶-3-甲8-異前列腺F2Elisa

昆明假諾卡氏 α-鄰苯乙酮核轉(zhuǎn)錄因子p65Elisa

球孢鏈霉球孢亞種 3-氟-5-硝苯胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1Elisa

寒冷桿 3-甲酸單氨氧化AElisa

馬賽博斯氏 降烯乳酸脫氫同工-XElisa

托魯斯山鏈霉 N-(3-氨基基)二乙乙酰氧化Elisa

深紅酵母 二乙基酮肉堿脂酰轉(zhuǎn)移IαElisa

水單胞 環(huán)戊二烯基鈉甘油-3-磷酸?；D(zhuǎn)移Elisa

環(huán)狀芽胞桿 4--2-甲硫基嘧啶白介2可溶性受體α鏈Elisa

黑腐皮殼 2,4-二-5-硝基嘧啶I型前膠原氨基端肽Elisa

金霉鏈霉 1,6-脫水-β-D-葡萄糖蛋白質(zhì)羰基化合物Elisa

秦氏蜜環(huán) 1,2,3,4-四氫-1-萘鹽酸鹽蛋白質(zhì)亞硝基化Elisa