詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:0.1M 硼酸緩沖液,pH8.4
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
本產(chǎn)品為0.1M 的硼酸緩沖液??蓱?yīng)用于BrdU 增殖檢測酸處理的中和等實驗。本品含有100mM 的硼酸、75mM NaCl,25mM 的四硼酸鈉,pH 為8.4。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
組蛋白H2A(H2A)英文名稱:H2A ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體包裝5g
組胺H4受體(HRH4)英文名稱:HRH4 ELISA Kit炭疽桿菌致死因子LF抗體包裝10mg
組豐富糖蛋白(HRG)英文名稱:HRG ELISA Kit蛋白BOC抗體包裝250mg
阻抑(PHB)英文名稱:PHB ELISA Kit肽A抗體包裝1g
足盂蛋白(PCX)英文名稱:PCX ELISA Kit腦鈉/利鈉肽抗體包裝5g
棕櫚?;さ鞍?/span>6(MPP6)英文名稱:MPP6 ELISA KitBcl2 beta蛋白抗體包裝1g
自身免疫調(diào)節(jié)因子(AIRE)英文名稱:AIRE ELISA Kit骨涎蛋白抗體包裝25g
轉(zhuǎn)運蛋白1(TNPO1)英文名稱:TNPO1 ELISA Kit死亡調(diào)解子抗體包裝5g
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)英文名稱:TFR2 ELISA KitApollon凋亡抑制蛋白抗體包裝1ml
轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)英文名稱:TRF ELISA Kit表面趨化因子受體6抗體包裝5ml
轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)英文名稱:TCF20 ELISA Kitβ-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體包裝1g
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)英文名稱:ATF6 ELISA Kit骨成型蛋白受體1A抗體包裝25g
轉(zhuǎn)錄激活因子5(ATF5)英文名稱:ATF5 ELISA KitBcl-xL蛋白抗體包裝5g
轉(zhuǎn)錄激活因子3(ATF3)英文名稱:ATF3 ELISA Kit磷化Bcl-xL(Ser62)抗體包裝100ml
轉(zhuǎn)狀腺蛋白(TTR)英文名稱:TTR ELISA Kit相關(guān)死亡促進因子Bad抗體包裝500ml
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)N/A
0.1M 硼酸緩沖液,pH8.4粉紅單端孢 二叔丁基疊氮草酸趨化素樣因子1檢測試劑盒
大腸埃希氏 2-乙趨化樣因子受體1檢測試劑盒
狂犬病病 3-芐氧基苯趨化因子CCL4樣蛋白1檢測試劑盒
黑曲霉 1-(2-苯并呋喃基)乙酮趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1檢測試劑盒
雙孢蘑菇 環(huán)吡酮雜質(zhì)B趨化因子配體17檢測試劑盒
靈芝(紅芝, 赤芝) 1-芘酸趨化因子配體21檢測試劑盒
佛羅里達(dá)側(cè)耳 6-氟-1-茚酮趨化因子配體5檢測試劑盒
玫煙色棒束孢 3-(2-)酸去甲腎上腺素檢測試劑盒
香菇 2-氟-3-硝基吡啶去唾液酸糖蛋白受體檢測試劑盒
網(wǎng)紋馬勃 二甲基硫氨甲酰氯全段甲狀旁腺素檢測試劑盒
劉氏屬 二硫化甲脒固酮檢測試劑盒
微白黃鏈霉 3-基噻吩脫氫酶1家族成員A1檢測試劑盒
碗狀瘤杯 5-氯-2-氟吡啶犬尿氨酸檢測試劑盒
大腸埃希 苯并-1,4-二氧六環(huán)-6-酸炔雌檢測試劑盒
無 4-溴-2,6-二甲缺血修飾白蛋白檢測試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)