商品介紹:
Retaspimycin hydrochloride是一種有效的Hsp90ATPase活性抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:857402-63-2 別名:IPI-504 純度:95.0% 分子量:624.17 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Hsp90ATPase活性抑制劑
英文名稱:Retaspimycin Hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
紅球菌轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體Human ONECUT1 ELISA Kit生存(survivin)
高山被孢霉NADH復(fù)合體5抗體Human OPA3 ELISA Kit腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)
動物雙歧桿菌乳亞種肌微管1抗體Human OPTN ELISA Kit腎損傷分子1(Kim-1)
櫟小皮傘髓性白血病蛋白1抗體Human OFD1 ELISA Kit腎(Renin)
Au(黑木耳)磷化絲裂原活化蛋白激1抗體Human OGT ELISA Kit腎上腺髓質(zhì)前體(Pro-ADM)
克魯斯假絲酵母組織相容性復(fù)合體2抗體Human OIP5 ELISA Kit腎上腺髓質(zhì)(ADM)
變位艾美耳球蟲磷化雷帕霉靶蛋白抗體Human OLFM1(Olfactomedin-1) ELISA Kit腎上腺能a1A受體(ADRA1A)
膠凍樣類芽孢桿菌甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體Human OLFM2 ELISA Kit腎上腺(EPI)
梨生囊殼孢磷化雷帕霉靶蛋白抗體Human OLFM3 ELISA Kit腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)
擬可可毛球二孢NADH復(fù)合體6抗體Human OLIG2(Oligodendrocyte transcription factor 2) ELISA Kit蛋白(nephrin)
黑曲霉黑色瘤相關(guān)抗原11抗體Human OMA1 ELISA Kit腎(RNLS/MAO-C)
灰綠犁頭霉同源盒基因Msx2抗體Human ODF2L ELISA Kit神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)
香菇磷化絲/蘇蛋白激MARK4抗體Human OMCG1 ELISA Kit神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)
圍小叢殼膜型基質(zhì)金屬蛋白胞質(zhì)尾結(jié)合蛋白1抗體Human OCTN2 ELISA Kit神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)
蘋果盤二孢周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體Human OCRL ELISA Kit神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)
釀酒酵母自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體Human DNAJB1(DnaJ homolog subfamily B member 1) ELISA Kit神經(jīng)粘著分子(NRCAM)
ATCC7830資源名稱: 德氏乳桿菌乳亞種 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)蛻皮激
塔賓曲霉Aspergillus│tubingensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)根皮苷
AS2.338資源名稱: 異常漢遜酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)梓
Hsp90ATPase活性抑制劑猴頭菇 1,3,5-苯酸緩激肽Elisa
雙色牛肝 2-甲基噻吩黃體生成Elisa
長雙歧桿嬰兒亞種 炔基正丁氨酸酯(IPBC)活性氧簇Elisa
大腸埃希氏 2,5-二甲基溴苯肌鈣蛋白IElisa
擬莖點(diǎn)霉 苯并呋喃酮肌酸激Elisa
北見微桿 9-溴-1-壬肌酸激同工MBElisa
球毛殼 2-乙基苯硫基質(zhì)金屬蛋白1Elisa
栗疫 苯基乙烯基砜基質(zhì)金屬蛋白13Elisa
細(xì)鏈格孢 2-溴-6-硝苯激動異構(gòu);分裂MBElisa
胡椒樹青霉 N-甲基二苯喋呤Elisa
紅霉擬無枝酸 4--3-氟苯甲甲狀腺Elisa
桑葉盤孢 鄰甲基降鈣基因相關(guān)肽Elisa
金黃殼囊孢 水楊酸鋰降鈣原Elisa
嗜熱嗜脂肪地芽孢桿 1,2,4-苯三酸酐(TMA)抗凝血ⅢElisa
微黃八疊球 5-甲基-2-吡羧酸狂犬病Elisa