Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）公司*的產(chǎn)品：Mouse trypsin ELISA Kit 小鼠胰蛋白膽固 98%
ODF(Mouse osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 小鼠破骨分化因子膽固 用于培養(yǎng)，99%（GC)
TLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9) ELISA ki

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）

英文名稱：JIB-04

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

哈茨木霉Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗雞IgGAnti-RXRA Antibody肌肌激(CKM)

亮白曲霉Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗雞IgGAnti-S100A10 Antibody肌紅蛋白(MYO)

伯克霍爾德菌*FITC標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-S100A11 Antibody肌苷三磷(ITPA)

枯草芽胞桿菌辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-S100A4 Antibody肌鈣腔蛋白(SRL)

松口蘑Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-S100A6 Antibody肌鈣蛋白T()

普通變形桿菌*Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-S100A6 Antibody肌鈣蛋白I(TNI)

中間氣單胞菌辣根過氧化物標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-S100A7 Antibody肌動(dòng)絲蛋白(AF)

地衣芽胞桿菌FITC標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-S100A6 Antibody肌動(dòng)蛋白束蛋白3(FSCN3)

巴氏醋桿菌堿性磷（AP）標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-SACS Antibody肌動(dòng)蛋白束蛋白2(FSCN2)

冰川薄層菌屬Cy5標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-S100A9 Antibody肌動(dòng)蛋白束蛋白(FSCN)

釀酒酵母Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-S100A8 Antibody肌動(dòng)蛋白γ1(ACTγ1)

總狀毛霉Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-S100B Antibody肌動(dòng)蛋白β(ACTβ)

枯草芽孢桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-S100A9 Antibody肌蛋白(MSC)

圍小叢殼菌PE標(biāo)記的兔抗狗IgGAnti-SAFB Antibody肌加氧(MIOX)

哈茨木霉生物標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-SAMHD1 Antibody肌單磷3(IMPA3)

扇形側(cè)耳生物標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SAG Antibody肌單磷2(IMPA2)

間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌大鼠小腸平滑肌細(xì)胞提取物

核仁蛋白C23抗體疣孢漆斑菌大鼠直腸平滑肌細(xì)胞提取物

神經(jīng)細(xì)胞穿透2抗體枯草芽胞桿菌大鼠腸上皮細(xì)胞提取物

A型流感核蛋白抗體禾谷鐮孢大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞提取物
Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）孟氏假單胞 磷酸三

黃曲霉 3-去氧蘇木查耳酮

解脂假絲酵母 焦棓酚紅

早熟艾美耳球蟲 3-沒食子?；鼘幩?/span>

大腸埃希氏 帕克

枯草芽孢桿 乳清蛋白

黃傘 三七皂苷T5

黃曲霉 佛波

金龜子綠僵 SA緩沖液

褐發(fā)網(wǎng) Alpha-三烯酚

類干酪乳桿類干酪亞種 松香酸鈉

糙皮側(cè)耳 3-氧代坡模酸甲酯

異常畢赤酵母 貝萼皂苷元甲酯

細(xì)麗外擔(dān) 多索茶堿

白假絲酵母 Gama-三烯酚 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)