產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EGFR酪氨酸激酶抑制劑
英文名稱:Gefitinib hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:100mg|500mg|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Gefitinib hydrochloride是一種有效的EGFR tyrosine kinase抑制劑,在NR6wtEGFR細(xì)胞中,IC50值為2-37nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:184475-55-6 別名:ZD-1839 hydrochloride 純度:99.68% 分子量:483.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
pBiFC-bJunVN173(Plasmid #22012)磷化轉(zhuǎn)錄因子3抗體Anti-IDO1 Antibody突觸囊泡蛋白Ⅱ(SYT2)
球孢發(fā)仙菌磷化轉(zhuǎn)錄因子3抗體Anti-IDO2 Antibody突觸囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)
小馬勃T介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體Anti-IDH1 Antibody(PB0632)突觸孔蛋白(SYNPR)
褐黃鱗銹耳磷化酪激A抗體Anti-IDH2 Antibody(PB0633)突觸蛋白2(SYNPO2)
黑木耳磷化酪激A抗體Anti-IDO1 Antibody(PB0634)突觸回蛋白4(SYNGR4)
尖孢鐮孢磷化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Anti-IDS Antibody突觸回蛋白3(SYNGR3)
葡萄座腔菌磷化非受體酪蛋白激2抗體Anti-IDS Antibody突觸回蛋白2(SYNGR2)
同絲毛殼磷化鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體Anti-IFITM1 Antibody突觸回蛋白1(SYNGR1)
壯麗假絲酵母磷化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體Anti-IFNAR1 Antibody突觸核蛋白γ(γSYN)
江西青霉酪相關(guān)蛋白2抗體Anti-IFITM1 Antibody突觸核蛋白β(SNCβ)
Pseudoclavibacter caeni SrinivasanTWIST蛋白抗體Anti-IFNAR2 Antibody突觸核蛋白α(SNCα)
土曲霉磷化酪羥化抗體Anti-IFNG Antibody突觸蛋白Ⅲ(SYN3)
尖孢鐮刀菌拓普西異構(gòu)Ⅰ抗體Anti-IFNG Antibody突觸蛋白Ⅱ(SYN2)
血紅密孔菌腎小管間質(zhì)腎炎抗原抗體Anti-IFNG Antibody突觸蛋白Ⅰ(SYN1)
巨獸芽孢桿菌跨膜蛋白176A抗體Anti-IFNG Antibody透明質(zhì)介導(dǎo)運動因子受體(HMMR)
哈茨木霉跨膜蛋白176A抗體Anti-IFNG Antibody透明質(zhì)結(jié)合蛋白1(HABP1)
5-羥色胺受體3A抗體釀膿鏈球菌小鼠支氣管成纖維細(xì)胞
5-羥色胺受體3D+3E抗體萊氏曼氏乳桿菌小鼠肺成纖維細(xì)胞
5-羥色胺受體3D抗體親和鏈霉菌小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞
5-羥色胺受體4抗體被孢霉屬(斜面)小鼠小腸上皮細(xì)胞
EGFR酪氨酸激酶抑制劑馬腺疫鏈球獸疫亞種 鈣、、鎂、鈉/Ca, K, Mg, Na硫酸皮膚Elisa
黑附球 新橙皮苷胸膜肺炎放線ApxⅣElisa
不動桿屬 卵黃鹽水腫瘤壞死因子βElisa
枯草芽孢桿 鈣、、鎂、鈉/Ca, K, Mg, Na父系表達基因2Elisa
副球?qū)?/span> 靛紅尼克酰-N-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
枯草芽孢桿 己二酸二酰肼過氧化物Elisa
少根根霉 亞油酸鈉低密度脂蛋白Elisa
類干酪乳桿 聯(lián)苯菊酯心鈉肽Elisa
豬肺炎支原體 甲基氫醌鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1Elisa
蘇云金芽胞桿松蜀亞種 闊馬酸疏基轉(zhuǎn)移Elisa
Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum 1,3-二甲基酸組H2受體Elisa
Sporosarcina (R)-4-芐基-2-惡唑烷酮β-羥丁酸Elisa
嗜鹽鹽單胞 2-甲?;邕蛱瞧べ|(zhì)Elisa
鹽古桿 (R)-(+)-1-芐基-3-吡咯烷G蛋白偶聯(lián)受體91Elisa
耐冷冷桿 N-基二硫代亞碳酸二甲酯短鏈脂肪酸Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)