商品介紹:
R406是Syk抑制劑,IC50為41nM,對(duì)Lyn活性較弱。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):841290-80-0 純度:99.73% 分子量:470.45 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Syk抑制劑(R406 free base)
英文名稱:R406 free base
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體Human Acetylated HB(Acetylated Hemoglobin) ELISA Kit人血紅蛋白C(HbC)免疫試劑盒
白色短波單胞菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體Human ProSAAS/PCSK1N(granin-like neuroendocrine peptide) ELISA Kit人血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒
挪威畢赤酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白39抗體Human GGH(Gamma-glutamyl hydrolase) ELISA Kit人血管抑/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)免疫試劑盒
華根霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白34抗體Human P2RY2(P2Y purinoceptor 2) ELISA Kit人血管性血友病因子裂解(ADAMTS-13/vWF-cp)免疫試劑盒
黃曲霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白75抗體Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) ELISA Kit人血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒
香菇卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白65抗體Human OT(Oxytocin) ELISA Kit人血管生成抑制因子(Arresten)免疫試劑盒
釀酒酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白157抗體Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) ELISA Kit人血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)免疫試劑盒
松針散斑殼卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90B抗體Human TXB2(Thromboxane B2) ELISA Kit人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體Human KYN(Kynurenine) ELISA Kit人血管生成4(ANG-4)免疫試劑盒
深紅酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白104抗體Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) ELISA Kit人血管生成2(ANG-2)免疫試劑盒
微白類諾卡氏菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體Human TXB2(Thromboxane B2) ELISA Kit人血管生成1(ANG-1)免疫試劑盒
凱斯特鞘單胞菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體Human OT(Oxytocin) ELISA Kit人血管生長(zhǎng)(ANG)免疫試劑盒
尖角凸臍蠕孢卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體Human KYN(Kynurenine) ELISA Kit人血管內(nèi)皮抑抗體(ES-Ab)免疫試劑盒
薔薇生鏈格孢卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白107抗體Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) ELISA Kit人血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒
假單胞菌屬卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體Human Acetylated p53(Acetylated p53) ELISA Kit人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒
Microterricola viridarii卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白56抗體Human Cleaved CASP9(Cleaved Caspase-9) ELISA Kit人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)免疫試劑盒
猴頭菌(猴頭蘑、刺猬菌)Hericium│erinaceus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRE鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白試劑盒槲皮-3-O-β-D-葡糖糖-7-O-
: 195-75資源名稱: 非O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRES1蛋白同系物,線粒體試劑盒胡薄荷
解脂假絲酵母Candida│lipolytica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREphrin-B2試劑盒紅花八角
Syk抑制劑(R406 free base)10-去乙酰巴卡丁III英文名稱: 2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione腺苷環(huán)化激活肽-27/38抗體包裝1g
10-氧多烯紫杉英文名稱: 9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedionep19ARF抑癌基因抗體包裝5g
13-O-(三乙基硅基)巴卡丁III英文名稱: 9-Bromophenanthrenep21蛋白抗體包裝100g
13-{[(3-N-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 3-BromophenanthreneP2Y1受體抗體/嘌呤受體抗體包裝25g
13-{[(3-N-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 3,6-Dimethylphenanthrene神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體包裝1g
13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 3-Methylphenanthrene絲裂原活化蛋白激p38α抗體包裝5g
13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 3-Bromo-1,10-phenanthroline促尿鈉排泄肽前體C抗體包裝10mg
13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 5-Chloro-1,10-phenanthroline磷脂磷2C抗體包裝50mg
13-順式-酯視黃英文名稱: 2-Chloro-1,10-phenanthroline配對(duì)盒基因1抗體包裝5g
13-乙基-17-羥基-18,19-dinor-17α...英文名稱: 4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline配對(duì)盒基因2抗體包裝250mg
13-乙基-18,19-二去基-17α-pregn-...英文名稱: 5,6-Dimethyl-1,10-phenanthrolinep21激活激2抗體包裝1g
14-柔紅霉英文名稱: 2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline磷酯Cβ3抗體包裝5g
15-基前列異酯英文名稱: 2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline磷化星形膠質(zhì)PEA15抗體包裝1g
15-基拉坦前列(游離)英文名稱: 2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline磷化星形膠質(zhì)PEA15抗體包裝25g
15β-羥基醋環(huán)孕英文名稱: 3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline廣譜角蛋白PCK抗體包裝5g