產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ROCK-II抑制劑(SR-3677)
英文名稱:SR-3677
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
SR-3677是高效的選擇性的ROCK-II抑制劑,IC50值為~3nM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1072959-67-1 純度:99.46% 分子量:408.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
乳桿菌屬Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBA2 Antibody動力蛋白胞漿1重鏈1(DYNC1H1)
絨毛青霉辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBB Antibody頂體蛋白(ACR)
柄桿菌生物標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE2I Antibody凋亡抑制因子5(API5)
尖孢鐮刀菌堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBD Antibody凋亡信號調(diào)節(jié)激I(ASK1)
生癌腸桿菌膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBB Antibody(PB0182)淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2(APLP2)
大腸桿菌Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE2I Antibody淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1)
白僵菌Cy5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE2I Antibody淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)
土曲霉金色變種Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE2Q2 Antibody淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)
地衣芽孢桿菌Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBE3A Antibody淀粉γ(Amyγ)
嗜鹽動性球菌PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UBR2 Antibody淀粉β(Amyβ)
三葉草根瘤菌羅丹明標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-FcAnti-UCP2 Antibody淀粉α(Amyα)
木賊鐮孢羅丹明標(biāo)記的兔抗猴IgGAnti-UCHL1 Antibody電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β肽(ETFβ)
麥根腐平臍蠕孢FITC標(biāo)記的兔抗猴IgGAnti-UCP2 Antibody電子轉(zhuǎn)移黃蛋白α肽(ETFα)
平菇(南京1號)膠體金標(biāo)記的兔抗猴IgGAnti-UCP1 Antibody電子傳遞黃蛋白脫氫(ETFDH)
青霉 堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗猴IgGAnti-UGCG Antibody電壓依賴性陰離子通道蛋白1(VDAC1)
哈茨木霉生物標(biāo)記的兔抗猴IgGAnti-UCP3 Antibody電碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4(NBC4)
腺苷硫激1抗體食菌小鼠肺大動脈組織提取物
腺苷硫激2抗體短波單胞菌小鼠肺大靜脈組織提取物
MAWD結(jié)合蛋白抗體多頭霉小鼠肺組織提取物
PCID1蛋白抗體掘氏疫霉小鼠關(guān)節(jié)軟骨組織提取物
ROCK-II抑制劑(SR-3677)小孢根霉須狀變種 苦參S
伯克利邦氏孔 苦參N
美靈 苦參W
薛瓦酵母 苦參X
釀酒酵母 5-甲基基-苦參C
普通紅色桿 連翹酯苷F
禿裸鏈霉 連翹酯苷H
膠孢 連翹酯苷I酯B
香菇 通關(guān)藤苷X
靈芝(紅芝, 赤芝) 金盞花苷E;去葡萄糖竹節(jié)參皂苷
產(chǎn)黃青霉 絞股藍皂苷XLVI
爪哇根霉 牛扁堿
宇佐美曲霉 番石榴苷
膨大彎頸霉 苦豆堿
血液鏈球 五味子酮
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)